《表1 ABHD11 AS1及内参基因GAPDH的引物序列》

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《lncRNA ABHD11-AS1在宫颈癌中的表达及其临床意义》

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定量实时聚合酶链反应（RT-qPCR）。根据试剂盒说明书，采用RNAiso Plus试剂盒提取血浆总RNA；NanoDrop 2 000分光光度计（Thermo Scientific）评估RNA质量。然后使用PrimeScript RT试剂盒将1μg总RNA逆转录为cDNA。最后，使用SYBR进行?Premix Ex Taq?II试剂盒（代码RR820A，TaKaRa)PCR扩增。每个反应设3个平行管，总反应体系为20μL，包括10μLTBE×Taq II（Tli RNaseH Plus，2×），0.8μLPCR正向引物（10μM），0.8μLPCR反向引物（10μM)，0.4μLROX(50×），2μLDNA模板和6μL无菌水。PCR反应条件如下：95℃30 s，然后在95℃下进行40个循环5 s，在60℃下进行30 s。在循环方案之后，于5℃下通过PCR产物的解离温度，连续监测荧光以产生熔解曲线，然后在50℃下冷却30 s。GAPDH作为内参基因，根据2-ΔΔct法进行相对定量表达分析。引物序列见表1。