《表2 rab7预测靶向序列的相关信息》

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《dCas9-gRNA在卡介苗侵染小鼠巨噬细胞过程中对rab7的调控作用》

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注解:（1）E:有效性评分；（2）NGG错配评分:0mismatch，1mismatch，2mismatches，3mismatches。

rab7 mRNA共2 173 bp（GenBank NM＿009005），包含10个外显子。利用在线gCRISPR-ERA设计靶向配对区。根据评分筛选出3条靶向序列（gRNA1、gRNA2、gRNA3），均位于第3外显子，gRNA序列正义链5’端加上BbsⅠ酶切识位点-cacc，反义链5’端加上-aaac。由于rab7-gRNA2存在3个碱基错配的风险，且gRNA3靶向位点距转录起始点（TSS）更近，且gRNA2与gRNA3存在位置接续的关系，故最后选择错配风险较小的gRNA1和gRNA3进行后续实验，见表2。