《表1 q PCR分析的引物序列》

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使用mRNA提取试剂盒,从脂肪组织和肝脏组织中提取总RNA。使用PrimeScriptTM RT Master Mix RR036A试剂盒对1μg总RNA进行反转录反应。使用POWER SYBR Green master mix试剂盒,以cDNA作为模板,分析m RNA表达水平。q PCR程序如下:初始保持步骤,在95℃30 s;95℃5 s、60℃30 s,40个循环;72℃30 s。55~95℃逐步获得熔解曲线。在通过基因GAPDH标准化后,使用(2-ΔΔCt)比较方法,分析靶基因的表达量。靶基因的引物见表1。