《表1 q PCR中应用的引物序列》

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《小麦籽粒次生物质对麦红吸浆虫幼虫解毒酶活性及基因表达的影响》

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在麦红吸浆虫幼虫转录组数据库搜索GST、Car E和CYP450酶编码基因，从中挑选表达量高的GST1、Car E2和CYP6A1 Unigene序列设计定量引物（表1）。以麦红吸浆虫GAPDH（Gen Bank登录号：KR733066）为内参，合成的c DNA为模板，按照Super Real Pre Mix Plus(SYBR Green）试剂盒说明书（TIANGEN，北京），在i Q5 Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad，Hercules，CA）上进行q PCR分析。反应体系（20μL）:2×Super Real Pre Mix Plus 10μL，上下游引物（10μmol·L-1）各0.8μL，c DNA模板1.0μL，RNase Free H2O 7.4μL。扩增程序：95℃预变性15 min；95℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸30 s，40个循环；最后95℃30 s，55℃1 min，95℃15 s，进行熔解曲线分析，反应结束后读取Ct值。每样品进行3次技术重复。