《表1 构建侵染性克隆和接种植物DNA-A和DNA-β检测所用引物》

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《侵染海南雪茄烟的中国黄花稔曲叶病毒侵染性克隆的构建》

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注：划线处为酶切位点。

以感染病毒的雪茄烟总基因组DNA为模板，应用引物A-0.5-Pst I-F和A-Xba I-R（表1）扩增0.5倍的DNA-A全长序列，回收的扩增产物与经Pst1和Xba I酶切的载体pCAMBIA1300用infusion酶连接，通过双酶切和测序筛选pCAMBIA1300-0.5A阳性克隆；以感染病毒的雪茄烟总基因组DNA为模板，应用引物A1-Xba I-F和A-Xba I-R（表1）扩增DNA-A全长，回收的扩增产物与经Xba I酶切的pCAMBIA1300-0.5A载体用infusion酶连接，获得含有1.5倍串联重复DNA-A侵染性克隆pCAMBIA1300-1.5A。