《表1 引物序列：大豆花叶病毒半夏分离物侵染性克隆构建及鉴定》

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《大豆花叶病毒半夏分离物侵染性克隆构建及鉴定》

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利用Primer Premier 5.0软件设计引物。其中pGreen SMV1F与SMV1R、SMV2F与pGreen SMV2R（pGreen SMV2R′）两对特异引物分别用于扩增大片段SMV-SXBX1和A尾28 nt（56 nt）的大片段SMV-SXBX2（图1A）；pGr35S-SMVF（pGreen SMVF′）和pGr35S-SMVR用于质粒载体线性化；SMV3F和SMV3R用于验证SMV-SXBX全长的有效性。在引物设计时，pGreen SMV1F与pGr35S-SMVR、pGr35S-SMVF（pGr35S-SMVF′）与pGreen SMV2R（pGreen SMV2R′）、SMV1R与SMV2F之间都分别有25–30 bp的重叠序列，以便于完成Gibson组装。引物均由生工生物工程（上海）股份有限公司合成（表1）。