《表1 引物序列：表达狂犬病病毒G蛋白重组犬瘟热病毒Snyder Hill株的构建及鉴定》

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《表达狂犬病病毒G蛋白重组犬瘟热病毒Snyder Hill株的构建及鉴定》

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提取CDV Snyder Hill株病毒RNA，反转录，根据其全基因序列（JN896987），设计引物F1-F、F1-R、F2-F、F2-R、F3-F、F3-R（表1），将CDV全长分为3段进行PCR扩增，每个片段重复4次扩增，扩增产物经凝胶电泳检测后回收，并连接至质粒p BlueScript SK（+），送由吉林省库美生物公司测序。通过SeqMan软件分析各段基因序列后，将各基因片段逐段克隆至目的载体p CI质粒CMV-IE启动子的下游，获得含CDV Snyder Hill全基因组的质粒p CI-CDV（图1）。以p CI-CDV为模板，分别PCR扩增CDV的3个基因片段，PCR产物由吉林库美生物公司测序鉴定。