《表1 本研究中所用引物：CmsCRC与佛手指状结构的伸展相关并受低温激活》

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《CmsCRC与佛手指状结构的伸展相关并受低温激活》

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注：下划线表示酶切位点。

以在甜橙基因组寻找CRC启动子序列（Cs7g11750.1）设计引物，克隆得到CRC基因启动子上游约1 kb长度序列，采用Primer Premier 5设计基因克隆引物（表1）。引物合成后，分别在佛手、香橼花芽的基因组中扩增，获得全长。PCR反应程序为：94℃预变性5 min；94℃变性30 s，退火45 s，退火温度均为58℃，72℃延伸90 s，40个循环；72℃延伸7 min。PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳并回收目的条带，连接到pMD19-T进行测序。测序后通过Place软件对CRC启动子进行预测分析。