《表1 本研究所用质粒:茶碱激活型RNA分子开关的构建及在枯草芽胞杆菌中调节外源基因表达的性能》

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《茶碱激活型RNA分子开关的构建及在枯草芽胞杆菌中调节外源基因表达的性能》


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质粒pBSG03A(由P43启动子控制GFP表达的大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭表达载体)由本实验室保存。以该质粒为模板采用定点突变和Infusion重组的方式构建突变体,所构建的质粒如表1所示,表2为构建相应质粒时的引物。在PCR得到的基因产物中加入DpnⅠ酶反应2 h以消除模板,对PCR产物进行纯化后对其进行基因组装,然后转入大肠杆菌感受态细胞进行转化并提取质粒测序,待序列验证正确后,再将其转入枯草芽胞杆菌,进行验证。