《表2.本研究所用引物：苏云金芽胞杆菌Sigma H对芽胞形成的影响》

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《苏云金芽胞杆菌Sigma H对芽胞形成的影响》

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The underlined part indicates restriction sites；FAM indicates carboxyfluorescein labeling.

根据Bt HD73菌株的sigH（HD73＿0093）基因序列设计扩增sigH基因的引物对sigH-F/sigH-R，并以HD73基因组作为模板，PCR扩增出sigH基因的开放阅读框（ORF）。利用Sal I和Bam H I对该片段进行双酶切，胶回收后插入pET21b载体的相应酶切位点，并热激转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中获得蛋白表达重组质粒，命名为pETsigH。提取质粒，利用pET21b质粒上通用引物确认插入序列的正确性。进一步将该质粒热激转化到大肠杆菌BL21（DE3）中得到蛋白表达菌株BL21（pETsigH）。