《表1 本研究所用引物:ABA合成基因StNCED2对马铃薯块茎形成的影响》

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《ABA合成基因StNCED2对马铃薯块茎形成的影响》


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注:下划线为BglⅡ和SpeⅠ的酶切位点;酶切位点之前碱基为保护碱基。

对照‘Desiree’于温室中生长40 d时,取其植株叶片材料,提取总RNA并进行反转合成cDNA。利用特异性引物(表1)扩增StNCED2的cDNA片段。PCR反应条件:94℃5 min;94℃30 s,55℃30 s,72℃2 min,30个循环;72℃10 min。通过将StNCED2的cDNA序列插入到载体p CAMBIA1304的BglⅡ和SpeⅠ酶切位点之间,获得StNCED2过表达载体pCAMBIA1304-StNCED2,然后用冻融法将其导入农杆菌GV3101菌株中。