《表1 本研究所用引物：中国野生毛葡萄芪合酶基因表达及对葡萄抗白粉病的影响》

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《中国野生毛葡萄芪合酶基因表达及对葡萄抗白粉病的影响》

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提取中国野生毛葡萄‘丹凤-2’叶片的总RNA，参考E.Z.N.A Plant RNA Kit（Omega）试剂盒说明书进行。将RNA反转录合成c DNA，此过程参照Fast King RT Kit(With g DNase）试剂盒（天根KR116）说明书进行。以c DNA为模板，设计扩增基因的引物（表1），分别在引物5′和3′端添加Bam H I和Sal I酶切位点序列，利用同源序列克隆Vq STS9和Vq STS21，将目标条带大小正确的产物回收，产物连接p GEM-T-easy载体，转入大肠杆菌T0P10感受态细胞中，培养至长出菌斑，挑取单克隆菌斑，菌液PCR检测，阳性菌液送至奥科生物有限公司测序。用E.Z.N.A Plasmid Mini Kit I(Omega）质粒提取试剂盒提取测序结果正确的菌液中的重组质粒，重组质粒和植物表达载体p CAMBIA2300分别用Bam HI/Sal I双酶切，将酶切后的目的基因与表达载体连接，转入农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）GV3101中，构建植物表达载体p CAMBIA35S::Vq STSs::GFP。