《表1 q PCR所使用引物及扩增效率》

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《发酵条件对植物乳杆菌叶酸合成的影响》

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取L.plantarum 4-3菌株12、24、36、48 h发酵液进行RNA提取，使用UNIQ-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒（生工生物工程（上海）股份有限公司），使用反转录试剂盒HiScript II Q RT SuperMix for qPCR（南京诺唯赞生物科技有限公司）进行反转录，最后进行荧光实时定量PCR(quantitative PCR，qPCR）测定L.plantarum 4-3叶酸合成相关基因表达情况。qPCR所使用的引物均为本研究自行设计，具体序列信息见表1，使用ChamQTM SYBR qPCR Master Mix（南京诺唯赞生物科技有限公司）对反转录后的产物进行扩增，以16S rRNA基因为内参，每个样品做3个重复，经过梯度PCR测试。虽然每对引物溶解温度不完全一样，但在60℃退火温度条件下均能达到较好的扩增效率，因此扩增程序统一为：95℃预变性30 s，95℃变性10 s，60℃退火30 s，72℃复性30 s，扩增40个循环后置于4℃保存。qPCR结果用-ΔΔCt代表相对表达量，以MRS培养基中12 h样品各个基因表达量作对照。