《表1 nir K和nir S功能基因的q PCR引物序列及扩增程序》

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《象山港典型生境沉积物反硝化细菌群落丰度与结构多样性》


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取约0.5g沉积物样品,使用土壤DNA提取试剂盒(Fast DNASPIN Kit for Soil)进行总DNA抽提,用分光光度计检测DNA的纯度和浓度,再用1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA,然后通过PCR扩增之前提取到的DNA,引物序列及基因扩增程序见表1。扩增体系:25μL,2.5μL 10×PCR Buffer缓冲液,2μL 2.5 m M d NTP Mix,1μL引物(5μM),0.15μL Taq聚合酶,10 ng DNA模板。扩增后送往上海美吉生物医药科技有限公司Illumina Mi Seq平台测序。