《表1 qRT-PCR引物序列》

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《miR-200 a联合糖类抗原125、白介素-17检测在上皮性卵巢癌早期诊断中的价值》

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按照Trizol试剂盒说明书操作提取血浆总RNA，按照mRNA反转录试剂盒操作步骤将2 ug RNA反转录为c DNA，之后按照SYBR Green RCR master mix试剂说明配反应体系并加样。实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR，qRT-PCR）反应体系共为20μL:SYBR Premix Ex TaqⅡ（2×）10μL，c DNA 2.0μL，上下游引物各0.8μL，ROX Reference DyeⅡ（50×）0.4μL，ddH2O 6.0μL。完成后将其放入荧光定量PCR仪上进行反应，程序设定为:95℃预热1 min，95℃15 s，60℃15 s，72℃15 s，共40个循环，72℃终延伸10 min。miR-200 a以U 6为内参基因，引物由上海汉恒生物科技有限公司合成，具体引物序列见表1。反应结束后收集数据，并对所得数据Ct值进行分析，采用2-ΔΔCt算法计算miR-200 a相对表达量。