《表1 构建截短质粒PCR所用引物序列》
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《转录因子FOSB mRNA 5′非翻译区内部核糖体进入位点的活性》
FOSB 5’UTR cDNA序列(NM_001114171)由生工生物工程(上海)有限公司合成,合成序列含有NdeⅠ和EcoRⅠ酶切位点。FOSB 5’UTR的全长基因序列和实验所需的各截短基因序列均以重组质粒pRL-FOSB-FL为模板进行扩增,在SV40启动子的载△pRL-FL上插入FOSB 5’UTR的全长基因序列,构建△pRL-FOSB-FL;同时又载体pRL-FL上插入各截短片段,构建出的截短片段的重组质粒分别为pRL-FOSB-J1-FL(-376 to-1)、pRL-FOSB-J2-FL(-592 to-217)、pRL-FOSB-J3-FL(-592 to-377)、pRL-FOSB-J4-FL(-188 to-1)、pRL-FOSB-J5-FL(-377 to-217)。将各重组质粒转化到感受态大肠杆菌Escherichia coli DH 5a中,涂板摇菌后,将菌液送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序,质粒截短PCR所用引物见表1,其中下划线是Nde I和EcoR I的酶切位点和保护碱基。引物均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。
图表编号 | XD00107292700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.07.01 |
作者 | 马晶、孙柳柳、马文囡、陶义芬、陈蕴、朱瑞宇、金坚 |
绘制单位 | 江南大学药学院、江南大学药学院、江南大学药学院、江南大学药学院、江南大学药学院、江南大学药学院、江南大学药学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |