《表2 串联质粒构建引物序列》

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《三种禽病毒抗原的串联表达、纯化及活性鉴定》

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Note:enzyme restriction sites are underlined.

利用表2中的引物，分别从p ET28a-p T5-I-im-VP2和p ET28a-p T7-E-im-fiber质粒中扩增出p T5-I-im-VP2片段和p T7-E-im-fiber片段，利用相应的内切酶处理后，依次克隆入p ET28a-p T5-F-im-fiber2质粒中，获得重组质粒p ET28a-F-I-E。按照此方法，将3个基因片段在质粒上的顺序进行互换，共获得6种不同串联顺序的质粒p ET28a-F-I-E、p ET28a-F-E-I、p ET28a-I-F-E、p ET28a-I-E-F、p ET28a-E-I-F和p ET28a-E-F-I。将6种不同串联顺序的重组质粒分别转化E.coli BL21（DE3）进行蛋白表达。