《表1 引物序列：ADV VP2主要抗原表位基因核酸疫苗与IL-12、IFN-γ细胞因子佐剂质粒的构建及鉴定》

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《ADV VP2主要抗原表位基因核酸疫苗与IL-12、IFN-γ细胞因子佐剂质粒的构建及鉴定》

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以ADV-G株VP2基因序列为骨架，通过对实验室现有34株国内ADV强毒株的VP2基因序列的比对，保留强毒株共有的关键性氨基酸位点，替换ADV-G株VP2的相应表位位置，同时去除抗原抗体复合物形成的关键区域，将整合好的序列按照真核基因偏好性密码子进行优化后，交由南京金斯瑞生物科技有限公司进行基因合成。IL-12的亚基（p35）序列参照GenBank:NP＿001152896.1，亚基（p40）序列参照GenBank:NM＿001303244.1，亚基与亚基之间的柔性肽为（G4S)4。IFN-序列参照Gen Bank:XM＿021205593.1，同时在氨基酸序列的C端添加6个组氨酸标签，交由南京金斯瑞生物科技有限公司进行基因合成，各基因分别连至克隆载体p MD18T的多克隆位点中，命名为pMD18-M、pMD18-IL、pMD18-IFN-，为了与真核表达载体pVAX1相连及后续表达，通过PCR在引物的5'端增加kozak序列和酶切位点EcoR I，在3'端增加酶切位点XhoI及终止密码子，同时构建带有EGFP标签的pVAX1-EGFP的阳性质粒对照，VP2主要抗原表位区（命名为M）的引物为M1、M2，IL-12的引物为IL1、IL2，及IFN-的引物为IF1、IF2，EGFP的引物为EP1、EP2（表1），引物交由生工生物工程（上海）股份有限公司进行合成。