《表1 IFN-γ、IL-12、CXCL-9和CXCL-2的引物序列》

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《竹荪多糖与多西紫杉醇联用抗肺癌效应及机制研究》

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采用实时荧光定量PCR法。动物实验于第15天结束后麻醉处死小鼠，取出脾脏，将脾脏置于两片灭菌玻片毛面间轻轻摩擦，制成细胞悬液，经流式细胞仪分选其中的MDSC，加入适量的Trizol液，提取RNA，采用PrimeScript RT Master Mix合成cDNA。采用SYBR GreenⅡMix试剂盒进行定量PCR分析，反应体系为15μl，包括：cDNA 1μg，上下游引物各0.5μl，SYBR GreenⅡMix 7.5μl，水补足，检测细胞因子IFN-γ、IL-12、CX-CL-9和CXCL-2 mRNA水平变化。扩增条件：95℃预变性1min，按以下条件扩增40个循环：95℃15s，57℃1min。引物序列见表1。