《表1 构建及鉴定EV71病毒的病毒拯救质粒所用的引物》

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《EV71病毒反向遗传学系统的建立及拯救病毒的鉴定》

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用AxyPrep体液病毒DNA/RNA小量试剂盒从EV71-Rescue病毒感染细胞悬液中提取病毒RNA，利用EV71 VP1基因特异性引物（表1）进行RT-PCR鉴定。以同等的MOI值（MOI=1）在RD细胞中接种EV71-Rescue和野生毒株，分别在第1、2、3、4、5、6、7天收集细胞上清并进行半数组织培养感染剂量（tissue culture infective dose，TCID50）测定，绘制病毒一步生长曲线，比较2种毒株的增殖特性。