《表1 EV-D68假病毒构建的引物列表》

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《肠道病毒D组68型假病毒的构建》


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通过Mag MAX 96 Viral RNA提取试剂盒抽提50μL EV-D68病毒培养液上清获得病毒全基因组;通过PrimeScript RT-PCR试剂盒将病毒核酸RNA进行逆转录,获得EV-D68病毒全基因组的cDNA,所用引物为试剂盒附带随机引物和特异性全基因组末端逆向引物。以获得的cDNA为模板,利用特异性引物进行PCR扩增,扩增获得片段是5'UTR(710bp)、P1(2 586 bp)、2A-3'UTR(4 080 bp)。以CV-A6 EGFP capsid和EV71 Luc replicon为模板,利用特异性引物进行PCR扩增,扩增获得片段是EGFP(732 bp)、Luciferase(1 650 bp),引物序列见表1。