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第一章PCR技术的分子生物学基础1

1．1 遗传基因与核酸1

1． 2 耐热DNA聚合酶13

1． 3 PCR技术的发明，原理及特点16

1． 4 PCR技术的各种类型及发展22

第二章PCR技术中的基本操作28

2． 1 标本的处理及模板制备与保存28

2． 2 PCR扩增操作技术48

2． 3 PCR扩增产物的检测分析58

2． 4 PCR常见问题及其对策68

第三章PCR技术在传染病病原体检测中的应用73

3． 1 PCR检测甲型肝炎病毒（HAV）73

3． 2 PCR检测乙型肝炎病毒（HBV）75

3． 3 PCR检测丙型肝炎病毒（HCV）82

3． 4 PCR检测戊型肝炎病毒（HEV）86

3． 5 PCR检测肾综合症出血热病毒（HFRSV)88

3． 6 PCR检测乳并没有瘤病毒（HPV）91

3． 7 PCR检测单纯疱疹病毒（HSV）94

3．8 PCR检测人巨细胞病毒（HCMV)97

3． 9 PCR检测人类免疫抽陷病毒（HIV）100

3．10 PCR检测人微小病毒B19104

3． 11 PCR检测乙脑病毒107

3． 12 PCR检测轮状病毒109

3． 13 PCR检测风疹病毒（RV）111

3． 14 PCR检测EB病毒113

3． 15 PCR检测腺病毒（AV）115

3． 16 PCR检测结核杆菌（TB）117

3． 17 PCR检测嗜肺军团杆菌（1aB）120

3． 18 PCR检测淋球菌（NG）122

3． 19 PCR检测沙门氏菌（SM）124

3． 20 PCR检测脑膜炎球菌126

3．21 PCR检测霍乱弧菌128

3．22 PCR检测幽门螺旋杆菌（HP）130

3．23 PCR检测白色念球菌133

3．24 PCR检测梅毒螺旋体（TP）135

3． 25 PCR检测沙眼衣原体（CT）137

3．26 PCR检测肺炎支原体（MP）140

3．27 PCR检测解脲支原体（UU）142

第四章PCR技术在寄生虫病早期诊断中的应用144

4．1 PCR检测弓形虫144

4．2 PCR检测疟原虫146

4．3 PCR检测阿米巴虫147

4．4 PCR检测卡氏肺胞子虫148

4．5 PCR检测利什曼原虫150

第五章PCR在肿瘤相关基因检测中的应用152

5．1 恶性肿瘤发生的分子生物学基础152

5．2 亚性肿瘤的基因诊断方法154

5．3 PCR检测ras癌基因155

5．4 PCR检测胰腺癌161

5．5 PCR检测肿瘤抑制基因P53162

5．6 PCR检测视网膜母细胞Rb基因169

5．7 PCR检测常见肿瘤中FAP基因的突变170

5．8 PCR检测K——19基因172

5．9 PCR检测常见肿瘤中C-erbB2基因173

5．10 PCR检测DNA聚合酶β基因突变175

5．11 PCR技术在白血病检测中的应用176

5．12 PCR检测人类Ｔ淋巴细胞白血病病毒186

5．13 PCR检测白血病患者体内的多药耐药基因表达189

第六章　PCR技术在遗传病早期诊断中的应用191

6．1PCR检测地中海贫血192

6．2 PCR检测丙酮尿症197

6．3 PCR检测血友病200

6．4 PCR检测Duchenne型Becher型肌营养不良症205

6．5 PCR检测性别及性别发育异常207

6．6 PCR检测性连锁鱼鳞病基因突变208

6．7 PCR检测脆性X——综合症209

6． 8 PCR检测享延顿氏病211

6．9 PCR检测线粒体疾病212

6．10 PCR检测α1抗胰蛋缺陷症215

6． 11 PCR检测视网膜细胞瘤218

6．12 PCR检测镰状细胞贫血219

第七章PCR技术在法医学鉴定中的应用221

7．1 法医生物样品中DNA的制备222

7．2 PCR构建DNA指纹图谱技术226

7．3 PCR在法庭物证鉴定中的应用227

第八章 PCR技术在其它生物学领域中的应用239

8．1 PCR在分子生物学研究中的就应用239

8．2 PCR技术在组织与群体生物学研究中的应用255

8．3 PCR技术的古生物学中的应用260

8．4 PCR技术的在动植物检疫中的应用261

第九章PCR实验室建设270

9．1 PCR实验室操作设备270

9．2 PCR实验室的操作程序276

9．3 PCR实验室操作的污染277

9．4PCR实验室建立280

9．5 PCR实验室操作注意事顶281

附录284

一、分子生物学大事年表287

二、分子生物常用名词解释287

三、PCR文献中常用缩写调注释291

四、分子生物学常用数据293

1．DNA 常用数据293

2． DNA分子量标准参照物294

3．核苷酸的物理参数294

4．遗传密吗表295

五、分子生物学常用试剂的配制296

1．PCR常用试剂的配制296

2．常用酶试剂的配制方法298

3．电泳缓冲液的配制方法299

4．其它常用缓冲液的配制方法300

六、限制性内切酶304

七、分子生物学常用实验技术307

1．玻璃及塑料器皿的硅烷化307

2．核酸浓度的测定307

3．DNA的纯化与浓缩308

4．同位素标记核酸的放射性测定309

5．放射自显影310

6．噬菌滴定测度311

7．菌咱保藏311

8．透析袋的处理312

9．葡聚糖的外理312