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第一章概论1

第一节 PCR技术的发明1

第二节 PCR技术的发展1

第三节 PCR技术基本原理2

第四节 PCR技术的特点4

第五节 PCR技术的标准化操作5

第六节 PCR技术有关影响因素11

第二章PCR技术的类型及应用14

第一节 免疫PCR技术14

第二节 定量PCR技术15

第三节 原位PCR技术16

第四节 毛细管PCR技术20

第五节 其他种类PCR技术21

第六节 几种特殊的PCR扩增模式23

第三章PCR技术实验条件26

第一节 PCR引物的设计26

第二节 GOLDKEY数据库的应用28

第三节 PCR反应条件的优化32

第四节 DNA模板制备方法34

第五节 RNA模板制备方法42

第六节 PCR扩增产物检测的方法45

第七节 电泳凝胶摄影技术62

第四章PCR技术质量控制64

第一节 PCR污染及预防64

第二节 避免扩增的DNA序列交叉污染65

第三节 PCR技术的室内质量控制67

第五节 PCR技术在临床检测中存在的问题及分析69

第四节 PCR技术的室间质量控制69

第五章基因诊断的临床意义74

第一节 基因诊断的应用范围74

第二节 病毒性肝炎75

第三节 性传播性疾病81

第四节 肺部病原体感染85

第五节 细菌性脑膜炎87

第六节 在癌基因检测中的意义90

第七节 几种特殊癌基因检测意义93

第六章PCR检测性病病原体106

第一节 PCR检测人类免疫缺陷病毒106

第二节 PCR检测梅毒螺旋体110

第三节 PCR检测淋病奈瑟氏菌112

第四节 PCR检测解脲支原体113

第五节 PCR检测沙眼衣原体115

第六节 PCR检测单纯性疱疹病毒116

第七节 PCR检测乳头瘤病毒117

第八节 PCR检测人类巨细胞病毒119

第九节 PCR检测白色念珠菌121

第七章PCR检测肝炎病毒123

第一节 PCR检测甲型肝炎病毒123

第二节 PCR检测乙型肝炎病毒125

第三节 PCR检测丙型肝炎病毒126

第四节 PCR检测丁型肝炎病毒128

第五节 PCR检测戌型肝炎病毒129

第六节 PCR检测庚型肝炎病毒130

第一节 PCR检测霍乱弧菌132

第八章PCR检测肠道致病菌132

第二节 PCR检测伤寒杆菌133

第三节 PCR检测沙门氏菌134

第四节 PCR检测志贺氏菌135

第五节 PCR检测出血性大肠杆菌0157:H7136

第六节 PCR检测肠毒性产气荚膜杆菌138

第九章PCR检测呼吸道致病菌140

第一节 PCR检测结核分枝杆菌140

第二节 PCR检测肺炎支原体141

第三节 PCR检测肺炎衣原体143

第四节 PCR检测嗜肺军团菌144

第五节 PCR检测绿脓杆菌145

第六节 PCR检测肺炎杆菌147

第一节 PCR检测脑膜炎双球菌148

第十章PCR检测脑膜炎病原体148

第二节 PCR检测新型隐球菌149

第三节 PCR诊断结核性脑膜炎150

第四节 多重PCR诊断细菌性脑膜炎151

第十一章PCR检测寄生虫153

第一节 PCR检测恶性疟原虫153

第二节 PCR检测阿米巴原虫154

第三节 PCR检测弓形虫156

第四节 PCR检测卡氏肺孢子虫157

第五节 PCR检测间日疟原虫158

第六节 PCR检测克氏锥形虫159

第七节 PCR检测利什曼原虫161

第八节 PCR检测隐孢子虫162

第九节 PCR检测旋毛形线虫163

第十节 PCR检测肠内贾第氏虫164

第十二章PCR技术在遗传性疾病诊断中的应用166

第一节 PCR诊断缺失型α—地中海贫血166

第二节 PCR诊断非缺失α—地中海贫血167

第三节 PCR检测β—地中海贫血168

第四节 PCR诊断甲型血友病168

第五节 PCR诊断乙型血友病170

第六节 诊断笨丙酮尿症171

第七节 PCR诊断视网膜色素变性171

第八节 PCR诊断先天性肾上腺皮质增生症172

第九节 PCR诊断镰状细胞性贫血173

第一节 PCR检测白血病时T细胞受体基因重排175

第十三章PCR技术在检测肿瘤基因中的应用175

第二节 PCR检测白血病时免疫球蛋白重链基因CDR—序列重排177

第三节 PCR检测慢性粒细胞性白血病时bcr—ab1嵌合基因的RNA序列179

第四节 PCR检测常见肿瘤ras基因突变180

第五节 PCR检测常见肿瘤APC基因185

第六节 PCR检测常见肿瘤C—erbB2基因186

第七节 PCR检测常见肿瘤DNA聚合酶—基因的突变188

附录1 PCR技术所用设备190

附录2 常用贮存液198

附录3 PCR实验常用缓冲液201

附录4 电泳缓冲液204

附录5 载样缓冲液205

附录6 常用裂解液206

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