《STD病原体基因诊断技术》

第一章 概述1

一、现代性传播疾病的特点1

二、性行为与临床感染4

三、性传播疾病发病原因9

四、性传播疾病基因诊断方法学评价11

第二章 人类免疫缺陷病毒22

一、HIV的分子生物学22

(一) HIV基因组结构及蛋白22

(二) HIV复制的调控24

二、分子生物学实验方法27

(一) 引物的设计28

(二) 核酸探针检测方法30

(三) PCR检测HIV32

三、临床意义38

(一) 血清抗体阳性病人HIV序列的检测38

(二) 血清抗体阴性病人的HIV序列的检测39

(三) 新生儿HIV序列的检测40

第三章 梅毒螺旋体42

一、苍白螺旋体分子生物学特征42

二、体液免疫反应43

三、分子生物学实验方法44

(一) 引物设计与选择44

(二) 操作方法45

四、基因诊断的临床评价47

五、应用PCR技术诊断梅毒49

六、临床意义53

第四章 淋病奈瑟氏菌55

一、淋球菌基因探针55

二、基因探针检测淋球菌61

(一) 淋球菌质粒探针的制备61

(二) 膜的制备与杂交方法61

三、PCR检测淋球菌62

(一) PCR检测淋球菌62

(二) 质粒DNA的提取62

四、临床意义64

(四) PCR扩增产物分析64

(三) PCR反应64

第五章 生殖道支原体66

一、分子生物学基础66

二、分子生物学检测方法70

三、临床意义73

第六章 沙眼衣原体76

一、沙眼衣原体基因结构76

(一) 外膜蛋白基因序列76

(二) 质粒DNA序列77

(三) rRNA基因序列79

(二) PCR反应扩增80

(三) 产物检测80

(一) 模板制备80

二、操作方法80

三、临床意义81

第七章 白色念珠菌83

一、基因探针检测念珠菌83

(一) 菌细胞培养及全细胞DNA的提取83

(二) 白色念珠菌肌动蛋白基因探针的构建86

(三) 白色念珠菌2.9kb探针86

(四) 临床上的应用评价87

二、PCR快速诊断白色念珠菌88

(一) 引物设计88

(二) 标本处理89

(三) PCR操作90

(四) PCR产物检测91

三、特异性和敏感性91

四、应用效果评价93

第八章 单纯疱疹病毒94

一、HSV基因组结构特点94

二、HSV基因转录与调节96

三、HSV的糖蛋白99

四、PCR检测单纯性疱疹病毒101

(一) 引物设计与选择101

(二) 操作方法101

(三) 临床意义102

一、乳状瘤病毒的基因结构及功能104

第九章 乳头瘤病毒104

二、人乳头瘤病毒与生殖器疣的发病关系108

三、PCR检测人乳头瘤病毒110

(一) 引物设计与选择110

(二) 操作方法111

(三) 临床意义112

第十章 人类巨细胞病毒114

一、人类巨细胞病毒的分子生物学特征114

二、人类巨细胞病毒基因组构成115

三、PCR检测方法116

(一) 引物设计与选择116

(二) 操作方法116

四、PCR等方法检测人类巨细胞病毒的应用评价118

(一) HCMV的PCR方法建立119

(二) HCMV的PCR引物设计120

(三) 套式PCR诊断120

(四) RT-PCR诊断活动型HCMV感染122

(五) 定量PCR123

(六) 自动封闭检测系统125

(七) 病毒血症定量检测125

(八) 抗原血症的定量检测126

五、临床意义128

附录1 常用贮存液的配制130

附录2 PCR实验常用缓冲液134

附录3 电泳缓冲液137

附录4 载样缓冲液139

附录5 常用裂解液的配制141