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目录1

第一章　免疫凝胶扩散试验1

第一节　原理和优点1

一、原理1

二、优点3

第二节　材料4

一、凝胶的种类4

二、琼脂的澄清法7

三、琼脂的浓度、电解质、pH和防腐剂9

第三节　方法11

一、分类11

二、制备凝胶平板、打孔和补底11

三、试验方法14

四、试验结果的观察19

第四节　应用21

一、炭疽病的凝胶琼脂扩散试验21

二、猪丹毒杆菌的凝胶扩散鉴定22

　三、多杀巴氏杆菌病的琼脂凝胶扩散试验23

四、用辐射免疫扩散法检查胎儿弧菌牛流产24

五、产单核细胞李氏杆菌血清型5的组分方法24

六、应用免疫扩散法检查肉毒梭菌毒素27

七、应用凝胶沉淀反应检查细菌的产毒素性27

八、检诊母牛的真菌性流产28

九、检感染烟曲霉绵羊血清中的沉淀素29

十、琼脂凝胶沉淀试验诊断家禽衣原体病30

十一、猪支原体肺炎的凝胶双扩散试验31

　十二、马传染性贫血的凝胶沉淀素扩散试验32

十三、猪瘟的琼脂凝胶双相双扩散试验34

十四、非洲猪瘟的免疫扩散试验35

十五、间接琼脂凝胶扩散试验法诊断牛瘟36

十六、用微量免疫扩散法检猪血清中的伪狂犬病病毒抗体37

十七、猪血球凝集脑脊髓炎的琼脂凝脂扩散试验38

十八、鸡马立克氏病的琼脂糖扩散试验40

附一：电解质溶液41

附二：缓冲液离子强度的计算法41

附三：蛋白质42

染色剂42

附四：琼脂凝胶平板上的写字墨水43

一、原理44

第二章　免疫电泳技术44

第一节　原理和优点44

二、优点45

第二节　材料与试剂46

一、缓冲剂46

二、支持介质47

三、抗原48

四、抗体49

第三节　工具49

一、动力装置50

　二、打孔器及打孔模子50

　三、纸“灯芯”50

六、水平板51

五、电泳台51

四、量注用吸管51

第四节　方法52

一、电泳52

二、检查沉淀线52

三、制备永久性标本53

第五节　临床的应用54

一、检脑脊髓液中的细菌性抗原54

二、检痰和气管渗出液中的肺炎球菌抗原55

三、检出链球菌C碳水化合物56

四、霉菌性感染的对流免疫电泳检验57

五、寄生虫病的对流免疫电泳检验58

二、方法59

第六节　火箭电泳59

一、基本原理59

三、结果判读60

第三章　酶免疫试验技术62

第一节　原理和优点62

一、原理62

二、优点62

第二节　材料64

一、可供标记的酶的种类64

二、交联剂（结合剂）65

三、丙球蛋白（抗体）及其纯化66

四、基质（底物）67

一、以戊二醛为交联剂使过氧化物酶与IgG结合69

第三节　抗体和抗原的酶标记69

二、高碘酸钠结合物70

三、苯醌结合法71

四、借助FNPS使辣根过氧化物酶与IgG结合72

第四节　酶免疫测定的一般方法72

一、间接法73

二、双抗体法74

三、标记抗原竞争法74

四、结果的判读75

第五节　在诊检畜禽疾病中的应用76

一、酶标记抗体诊检猪瘟76

二、狂犬病的酶免疫试验77

三、鸡马立克氏病的酶免疫试验80

四、用酶标免疫吸收检验技术检出口蹄疫病毒81

五、非洲猪瘟的免疫过氧化物酶法的小蚀斑检定82

六、酶免疫试验检猪病料中的猪肺炎支原体85

七、弓浆虫病的诊检85

八、诊检猪旋毛虫的感染86

九、血吸虫病的酶标记试验88

第六节　抑制—酶免疫检定91

附一：测定适宜的抗原浓度92

附二：测定适宜的结合物浓度93

第四章　荧光抗体技术94

第一节　荧光抗体技术的特点94

第二节　荧光抗体技术的设备95

一、光源95

三、滤板96

二、显微镜96

五、显微镜照相机97

六、使用荧光显微镜时应注意事项97

　四、高压起动装置和稳压器97

第三节　荧光抗体技术的先决条件和存在问题98

一、先决条件98

二、存在问题99

第四节　荧光抗体技术的一般程序100

一、流程概述100

　二、荧光抗体的染色方法101

一、炭疽病105

二、猪丹毒105

第五节　荧光抗体技术在诊断畜禽传染病和寄生虫病中的应用105

三、李氏杆菌病106

四、野兔疫106

五、腐败梭菌106

六、沙门氏杆菌病108

七、布氏杆菌病109

八、胎儿弧菌病109

九、坏死杆菌病110

十、结核病111

十一、钩端螺旋体病111

十二、猪痢疾112

十三、猪支原体病113

十四、鉴别牛支原体115

十五、猪瘟116

十六、猪传递性胃肠炎117

十七、马传染性贫血118

十八、口蹄疫119

　十九、牛病毒性流产120

　二十、猪传染性水120

泡病120

二十一、鸡新城疫121

二十二、鸡马立克氏病121

二十三、禽脑脊髓炎122

二十四、鸭瘟123

二十五、弓浆虫病123

二十六、诊检猪阿氏后圆线虫病125

第一节　原理127

第五章　血清中和试验127

第二节　试验方法128

一、简单定性中和试验128

二、固定血清稀释病毒法129

三、固定病毒稀释血清法131

四、中和曲线法131

第三节　血清中和试验的应用132

一、猪瘟细胞培养物的中和试验132

二、猪流行性感冒的中和试验133

　三、猪红痢的中和试验133

四、猪伪狂犬病的中和试验134

五、猪血球凝集脑脊髓炎的血清中和试验134

　七、马传染性贫血的中和试验135

六、口蹄疫的中和试验135

　八、蚀斑中和试验诊检马脑脊髓炎136

九、马动脉炎的中和试验138

十、马鼻肺炎的中和试验138

十一、非洲马瘟的中和试验139

十二、羊肠毒血病的中和试验141

十三、鸡新城疫的中和试验142

十四、鸡传染性支气管炎的中和试验143

十五、鸭瘟的中和试验143

十六、小鹅瘟的血清中和试验144

　十七、狂犬病的血清中和试验144

十八、猪传递性胃肠炎的血清中和试验145

第一节　间接血球凝集试验的一般程序147

第六章　有关血球凝集的免疫学试验147

一、血球的保存与固定148

二、红血球的致敏149

三、待检血清与稀释液152

四、间接血凝试验的操作152

第二节　间接血凝在诊断畜禽疾病中的应用156

一、猪支原体性肺炎的间接血凝试验156

二、猪囊虫病的活体诊断157

　三、钩端螺旋体病的间接血凝试验159

四、马棒状杆菌抗体的间接血凝试验160

五、鸡马立克氏病的间接血凝试验161

六、犬组织胞浆菌病的间接血凝试验162

第三节　反向间接血球凝集试验163

一、基本程序164

二、猪瘟的反向间接血凝试验167

三、猪传染性水泡病与口蹄疫的快速鉴别诊断169

第四节　间接血凝抑制试验172

第五节　乳胶凝集试验172

一、聚苯乙烯乳胶的合成173

二、钩端螺旋体病的乳胶凝集试验174

三、炭凝集反应快速检验活猪囊虫病176

第六节　免疫粘附血凝试验178

第七章　其它免疫试验方法180

第一节　玫瑰花结形成试验180

一、基本步骤180

二、犬恶性淋巴瘤的红细胞—抗体—补体—花结技术182

第二节　巨噬细胞移动抑制试验183

一、收集中性球的方法184

二、从小鸡腹腔取得巨噬细胞的简单方法184

三、白细胞的移动试验185

四、牛结核病的间接移动抑制试验186

第三节　巨噬细胞吞噬试验188

第四节　生长凝集现象及生长抑制试验190

第五节　血球吸附试验191

第六节　印度墨免疫染色反应试验193

第七节　单相辐射溶血技术194

附录　196

一、免疫球蛋白的提取和纯化196

二、几种常用缓冲液的配制205