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目 录1

总论1

A 基因工程主要步骤的基本操作5

实验一碱变性法抽提pBR322质粒DNA5

实验二氯化铯密度梯度超离心提取pXZ6

质粒DNA22

实验三DNA的纯度、浓度与分子量的测定36

DNA中的RNA48

实验四用Sepharose 2B柱层析法去除质粒48

实验五DNA的酶切与连接59

实验六重组DNA的转化78

实验七转化子DNA的快速鉴定——快速细胞91

破碎法91

实验八重组质粒DNA的快速制备与酶切98

B 重组DNA的进一步检测107

实验九DNA片段的分离——从琼脂糖凝胶中分离DNA片段107

实验十 切口移位(Nick Translation)法制备32P-DNA探针119

实验十一Southern印迹杂交法133

实验十二菌落原位杂交143

实验十三λ噬菌体DNA(分子量标记)的制备151

实验十四 用质粒DNA释放法提取pYPI并测定其分子量165

实验十五 电子显微镜法测定pYPI重组质粒DNA分子量173

附录185

一各种试剂的母液配方185

二常用的抗菌素189

三玻璃和塑料器皿的硅化190

四核酸凝胶电泳图谱摄影191

五X-光底片的冲洗方法198

六常用仪器的操作方法200

高速冷冻离心机(日立)200

CENTRIKON T—2080型(瑞士)超速离心机201

微波炉204

液体闪烁计数仪204

电子显微镜205

参考文献209

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