《基因融合技术》

菌株1

细菌噬菌体4

导论11

实验16

实验1以遗传学转座法分离lacZ融合体16

实验2 在质粒上以体外突变或非同源重组法建造LacZ+蛋白质融合体27

实验3 在高拷贝数质粒上克隆lacZ融合体38

实验4 利用基因融合和DNA杂交技术分析染色体的结构44

实验5 用重组DNA技术构建λ转导噬菌体50

实验6 用DNA杂交技术鉴定λ转导噬菌体54

实验7 用遗传学互补法鉴定λ转导噬菌体58

实验8 Tn10在基因中或其附近的插入突变体的分离64

实验9 染色体的有目的诱变71

实验10 染色体缺失突变体的分离75

实验11 在λ转导噬菌体上分离缺失突变体83

实验12 λ转导噬菌体的有目的突变87

实验13 构建遗传图谱92

实验14 用基因融合法在体外分离特殊的转导噬菌体以确定基因的方向96

方法101

方法1 2-ml高滴度λ裂解液的制备101

方法2 噬菌体平板贮液的制备102

方法3 1-liter裂解液的制备104

方法4 由平板贮液或小量裂解液中纯化噬菌体的快速方法105

方法5 λInt和xis功能的红色空斑试验107

方法6 λ溶源菌的筛选108

方法7用紫外光诱导λ溶源菌111

方法8 用Xgal计数LacZ+噬菌体空斑112

方法9 原噬菌体缺失突变体中噬菌体基因的检测113

方法10 P1 vir裂解液的制备115

方法11 P1 Tn9clr100裂解液的制备116

方法12 用P1 vir作遗传学转导117

方法13 MudI（lac，Ap）裂解液的制备118

方法14 MudI（lac，Ap）的转导作用119

方法15MudI（lac，Ap）溶源菌转变为λ溶源菌120

方法16 λcI+融合菌向λcI+ts857溶源菌的转变121

方法17 Tn10由λNK561转移到E·coli染色体和一种随机Tn10库的制备123

方法18 染色体缺失突变体的分离和随后的λ诱导124

方法19 用EDTA平板选择λ缺失突变体125

方法20 λ中含有一个Dam等位基因缺失突变体的分离129

方法21 亚硝基胍突变131

方法22 用紫外光突变λ132

方法23 噬菌体的羟胺诱变134

方法24 λ的mutD突变135

方法25 从细菌细胞中抽提DNA137

方法26 λ DNA的大量分离140

方法27 λ DNA的快速分离142

方法28 质粒DNA的大量分离143

方法29 质粒DNA的快速分离法146

方法30 构建λ杂种151

方法31 构建杂种质粒153

方法32 λ文库的转导154

方法33 根据CsCl密度筛选杂种噬菌体158

方法34 制备细菌DNA的Sau 3A部分降解物160

方法35 利用辅助噬菌体构建λD69杂种的溶源性细菌164

方法36 与λDamsrIλ3共同构建选择的λ杂种噬菌体165

方法37 氯化钙处理过的细胞的转化167

方法38 氯化钙处理过的细胞的转染168

方法39 λDNA的体外包装170

方法40 酚/氯仿抽提DNA样品174

方法41 乙醇沉淀DNA176

方法42 DNA制备的滴透析法178

方法43 DNA的限制性内切酶酶切及凝胶电泳179

方法44 DNA吸印转移182

方法45 DNA-DNA杂交的琼脂糖凝胶的脱水法185

方法46 DNA-DNA杂交187

方法47 噬菌斑杂交191

方法48 DNA的缺口转移194

方法49 用BND-纤维素纯化DNA195

方法50 微型胶过滤柱的准备197

方法51 核酸酶BAL-31酶切198

方法52 SDS蛋白质抽提物的制备201

方法53 蛋白质的电泳202

方法54 特大细胞：质粒基因的表达206

附录208

附录A 培养基和标准溶液208

附录B Escherichia coli的表现型和基因型213

附录C 可转移的遗传元件216

附录D Escherichia coli的生长和贮存注意事项222

附录E λ生长和贮存注意事项224

附录F λ的表现型和基因型227

附录G 噬菌体裂解液的滴定231

附录H 自发诱导和从λ溶源性细菌中释放噬菌体233

附录I 克隆载体236

附录J 利用重组从一个复制子到另一个复制子的移动突变245

附录K 基因融合的遗传学鉴定251

附录L λplacMu I的应用253

附录M 乳糖操纵子258

附录N Omp调节子280

附录O 麦芽糖调节子283

附录P 阿拉伯糖调节子285

文献288

英汉名词对照和索引309