《现代实验血液学研究方法与技术》

第一章造血细胞的体外培养1

第一节 概述1

第二节 血细胞分离方法5

第三节 骨髓基质细胞培养24

第四节 造血细胞集落培养和测定36

第五节 造血细胞系的建立和应用59

第六节 造血细胞的无血清培养74

第七节 杂交瘤单克隆抗体的制备技术82

第二章造血细胞的大量培养92

第一节 液体悬浮培养技术93

第二节 灌注式细胞培养技术与无菌连接器98

第三节 微载体——微囊培养技术102

第四节 大载体生物反应器106

第三章造血细胞的细胞化学分析114

第一节 造血细胞的基础细胞化学分析114

第二节 造血细胞的免疫细胞化学分析126

第三节 造血细胞的核酸分子原位杂交分析132

第四章造血细胞超微结构的研究技术160

第一节 透射电子显微镜超薄切片的制备160

第二节 电子显微镜免疫细胞化学技术168

第三节 电子显微镜细胞化学技术175

第四节 扫描电子显微镜标本制作技术178

第五节 扫描电子显微镜表面分子标记术180

第六节 电镜放射自显影技术182

第七节 冷冻蚀刻技术183

第八节 电镜生物样品的负染色技术184

第五章血液系统中细胞凋亡的研究方法186

第一节 细胞凋亡的概念及形态学特点186

第二节 细胞凋亡的生理意义188

第三节 血液系统中的细胞凋亡189

第四节 细胞凋亡的形态学研究方法199

第五节 细胞凋亡的生物化学研究方法203

第六节 细胞凋亡的免疫化学分析方法210

第七节 细胞凋亡的分子生物学研究方法212

第一节 概述222

第六章血液流变学研究方法及其应用222

第二节 血液粘度测量方法223

第三节 血浆粘度的测量225

第四节 血液粘弹性检测方法227

第五节 红细胞聚集性检测方法231

第六节 红细胞变形性检测方法233

第七节 白细胞流变性研究技术237

第一节 血液动力学基本概念241

第七章血液动力学研究方法及其应用241

第二节 光电容积描记法测定外周血循环242

第三节 阻抗容积描记法测定心脏血液动力学244

第四节 深静脉血栓的无创性测定247

第五节 放射性核素测定肢体深静脉血栓形成249

第六节 多普勒超声血流测定人体动、静脉血流动力学250

第七节 多普勒超声血流测定在急慢性动物实验中应用252

第八节 Swan-Ganz导管法254

第九节 电磁流量计法测定人体及动物血液动力学257

第十节 放射性微球法测定心脏及组织血流量258

第十一节 86Rb测定心肌营养性血流量260

第八章免疫细胞表面标志的研究方法及检测技术263

第一节 免疫细胞的表面标志263

第二节 免疫荧光技术264

第三节 免疫细胞化学方法检测免疫细胞表面标志276

第九章放射性核素及示踪技术在血液学研究中的应用278

第一节 放射性标记化合物278

第二节 放射性标记化合物在血液学研究中的应用279

第三节 放射性核素标记细胞及应用286

第四节 放射性核素标记核酸及示踪应用290

第五节 放射自显影和细胞动力学研究技术298

第十章血细胞抗氧化酶和自由基检测技术303

第一节 超氧化物歧化酶活力测定303

第二节 谷胱甘肽过氧化物歧化酶304

第三节 过氧化氢酶活力测定305

第四节 超氧阴离子自由基测定306

第五节 测量自由基的电子自旋共振技术307

第六节 一氧化氮浓度测定308

第七节 一氧化氮合成酶活性测定309

第八节 一氧化氮和过氧化亚硝酸离子的合成310

第九节 脂质过氧化物测定311

第十一章白细胞质膜和胞质体的分离制备及标志酶测定313

第一节 中性粒细胞分离313

第二节 白细胞质膜制备315

第三节 中性粒细胞胞质体制备317

第四节 中性粒细胞质膜标志酶测定319

第五节 可溶性刺激物制备324

第一节 蛋白质纯化工作的一般策略326

第十二章蛋白质分离和纯化技术326

第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳327

第三节 离子交换层析333

第四节 疏水作用层析337

第五节 聚焦层析338

第六节 凝胶过滤层析340

第七节 亲和层析342

第八节 制备电泳345

第九节 蛋白质溶液的浓缩347

第十节 蛋白质纯度分析349

第十一节 蛋白质定量分析350

第十三章分子生物学基础实验技术353

第一节 基因组DNA提取353

第二节 细菌质粒DNA提取356

第三节 RNA提取359

第四节 DNA凝胶电泳364

第五节 噬菌体展示技术367

第六节 其他常用实验技术368

第十四章血型基因分型技术372

第一节 分子生物学技术基础372

第二节 红细胞血型基因分型378

第三节 血小板血型基因分型381

第四节 粒细胞血型基因分型382

第五节 免疫球蛋白Gm基因分型383

第十五章HLA分子生物学研究技术385

第一节 HLA基因和HLA抗原385

第二节 HLA血清学分型389

第三节 HLA基因分型392

第四节 PCR-SSOP分型技术395

第五节 PCR-SSP分型技术400

第十六章基因突变检测和DNA多态性分析409

第一节 PCR基本方法409

第二节 等位基因特异性寡聚核苷酸探针杂交法415

第三节 限制性内切酶长度多态性分析416

第四节 单链DNA构象多态性分析418

第五节 变性梯度凝胶电泳和温度梯度凝胶电泳420

第六节 PCR直接测序421

第七节 双脱氧指纹图谱法424

第十七章基因转移技术426

第一节 基因转染哺乳动物细胞技术426

第二节 基因转化大肠杆菌技术430

第三节 转基因动物432

第十八章肿瘤细胞耐药表型及耐药基因表达调控研究技术455

第一节 肿瘤细胞耐药表型和机制455

第二节 肿瘤耐药细胞株的建立及鉴定460

第三节 多药耐药基因及表达产物的测定464

第四节 寻找肿瘤耐药性逆转剂方法480

第五节 逆转录病毒介导的人类多药耐药基因(mdfl)cDNA转染和表达实验研究488

第十九章实验白血病研究技术499

第一节 引言499

第二节 动物白血病诱发方法499

第三节 免疫缺陷小鼠在人白血病研究中的应用503

第四节 微量残留白血病实验研究技术508

第五节 特异性标记基因(Lac-Z)转染在白血病研究中的应用513

第六节 转基因动物在白血病研究中的应用516

第二十章恶性血液病及相关肿瘤检测的遗传学技术524

第一节 绪论524

第二节 家族性白血病的早期发现和基因诊断525

第三节 散发性白血病的早期发现和基因诊断532

第四节 骨髓增生异常综合征(MDS)的细胞遗传学和基因诊断535

第五节 大鼠MDS基因治疗544

第六节 恶性白血病共同遗传背景和遗传咨询547