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第一章生化检验学的基本知识与技术1

第一节 标本的采集、处理与保存1

第二节 实验须知2

第三节参考值及其范围2

一、参考值研究的设计3

二、预告值5

三、医学决定性水平8

第四节分析仪器的质量保证10

一、波长校正11

二、线性检查14

三、杂光检查15

四、比色杯的质量检查16

五、分光光度计工作状态监测17

六、稳定性检查18

七、重复性检查18

八、灵敏度检查18

第五节蒸馏水的质量19

一、蒸馏水的制备方法19

二、纯水纯度检查20

第六节 缓冲液20

第七节常用玻璃仪器的使用和注意事项28

一、计量仪器的种类和使用28

二、一般玻璃仪器的使用和注意事项30

三、玻璃器皿的清洗30

四、容量玻璃仪器的检定多用衡量法31

第二章方法学评价与质量控制32

第一节几个基本概念32

一、准确度32

二、精密度32

三、敏感性33

四、特异性33

五、实验误差33

第二节方法学选择与评价34

一、方法选择与评价的意义和重要性34

二、实验方法的分级35

三、标准品的分级35

四、方法选择的要求35

五、方法选择与评价的步骤36

六、评价实验36

七、可接受性的决定41

八、评价实验的书面报告47

第三节质量控制48

一、临床化学质量控制的基本内容与步骤48

二、室内质量控制52

三、室间质量评价55

四、Monica质控图58

第四节方法学评价的实验训练60

实验2—1 重复性试验61

实验2—2 回收试验61

实难2—3 干扰试验62

实验2—4 方法对比试验63

第三章葡萄糖测定66

第一节血糖测定66

实验3—1 葡萄糖氧化酶法66

实验3—2 邻甲苯胺法68

实验3—3 口服葡萄糖耐量试验70

第二节其他体液中葡萄糖的测定72

一、脑脊液中葡萄糖定量检查72

二、尿液中葡萄糖定量检查73

三、胸、腹水及关节液中糖定量检查74

第三节糖化血红蛋白测定74

一、阳离子树脂交换层析法75

二、亲和层析75

三、高压液相层析75

四、琼脂糖凝胶电泳75

五、等电聚焦电泳75

六、硫代巴比妥酸比色法75

七、荧光比色法75

八、放射免疫法75

实验3—4 糖化血红蛋白离子交换微柱层析法76

附1：GHb微柱法的快速离心处理77

附2：病例78

第四章血脂测定81

第一节血清总胆固醇的测定81

实验4—1 血清TC化学法——修改LRC法81

实验4—2 酶法——CE-COD-POD法82

第二节血清甘油三酯的测定85

实验4—3 血清TG化学法（乙酰丙酮呈色法）86

实验4—4 GK-GPO-POD法88

第三节血清LDL-C的测定90

实验4—5 血清LDL-C的测定91

第四节血清HDL-C的测定92

实验4—6 血清HDL-C测定（DS-Mg2+－酶法）92

第五节血清HDL-C亚类测定93

实验4—7 血清HDL-C亚类测定93

第六节 血脂测定标准化简介95

第七节脂蛋白颗粒中载脂蛋白的测定97

实验4—8 Apo B100的测定（RID法）97

第八节血浆脂蛋白99

一、血浆脂蛋白的理化性质99

二、血浆脂蛋白的结构99

三、血浆脂蛋白的合成101

四、血浆脂蛋白的分解代谢102

五、高脂蛋白血症111

第五章血浆蛋白的测定120

第一节 血浆蛋白120

第二节血浆总蛋白测定120

实验5—1 血浆总蛋白测定（双缩脲法）121

第三节血清白蛋白测定123

实验5—2 血清白蛋白测定（BCG法）123

第四节脑脊液和尿液蛋白质定量测定125

实验5—3 脑脊液蛋白质定量（磺基水杨酸法）125

实验5—4 尿液蛋白质定量（磺基水杨酸法）127

第五节血浆纤维蛋白原及血清粘蛋白测定127

实验5—5 血浆纤维蛋白原测定（盐析—双缩脲法）127

实验5—6 血清粘蛋白测定（酚试剂法）129

第六章酶活性测定132

第一节米氏常数（Km）在临床酶学检验中的应用132

一、Km的意义132

二、Km的实际应用133

三、Km值的测定135

第二节酶活性测定方法——动力学测定法138

一、酶促反应过程138

二、测定酶活性方法的特点138

三、固定时间法（二点法）139

四、连续监测法（速率法）140

五、酶活性测定结果的表示142

六、酶样品的贮存与处理143

七、酶活性测定方法的标准化与质量控制145

第三节血清酶在临床诊断上的应用146

一、血清酶的分类146

二、控制血清酶水平的因素147

三、血清酶活性的生理差异149

四、血清酶活性测定的选择和评价150

五、血清酶活性测定在临床诊断中的应用举例150

实验6—1 碱性磷酸酶的Km值测定154

实验6—2 血清ALP活性测定（磷酸苯二钠法）155

实验6—3 血清ALT活性测定（改良赖氏法）157

实验6—4 血清AST活性测定（改良赖氏法）160

实验6—5 血清γ—谷氨酰转肽酶（γ—GT）测定（对硝基苯胺法）161

实验6—6 血清LDH活性测定（连续监测法）162

实验6—7 血清CK活性测定（酶偶联连续监测法）164

实验6—8 a—淀粉酶活性测定（固定时间法）167

第七章电泳分析技术170

第一节概述170

一、电泳分析技术发展概况170

二、电泳分析技术的分类170

第二节电泳的基本原理和操作要点171

一、电泳的基本原理171

二、影响电泳的因素172

三、电泳的一般操作技术175

第三节醋纤膜电泳分析176

实验7—1 血清蛋白质醋纤膜电泳177

第四节琼脂糖凝胶电泳182

实验7—2 琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶（LDH）同工酶182

实验7—3 琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白184

第五节聚丙烯酰胺凝胶电泳186

一、聚丙烯酰胺凝胶电泳的特点186

二、聚丙烯酰胺凝胶的聚合186

三、聚丙烯酰胺凝胶的孔径187

四、缓冲系统的选择188

实验7—4 血清蛋白质盘状电泳分析188

第六节蛋白质等电聚焦电泳技术简介191

一、等电聚焦电泳的原理191

二、电泳系统pH梯度的建立192

实验7—5 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳192

第七节蛋白质转移电泳简介193

一、转移电泳的出现193

二、转移电泳的实验技术194

三、转移电泳的优点194

四、蛋白质转移电泳的应用194

第八章血浆无机离子测定198

第一节血清钠、钾测定198

实验8—1 血清钠、钾火焰光度分析法199

实验8—2 血清钾四苯硼钠比浊测定法205

第二节血清氯测定207

实验8—3 血清氯测定（汞滴定法）208

第三节血浆（血清）〔HCO3-〕测定210

实验8—4 血浆CO2—CP测定（滴定法）210

第四节 阴离子缺额212

第五节血清钙、无机磷的测定213

一、血清钙测定214

实验8—5 血清钙测定（EDTA·Na2滴定法）215

实验8—6 血清钙测定（甲基百里酚蓝比色法）216

二、血清无机磷测定217

实验8—7 血清无机磷测定（硫酸亚铁还原法）218

第九章血气分析220

第一节血气分析的物理化学基础220

一、气体定律220

二、气体容积表示法221

三、ctCO2、cHCO3、cdCO2、pH的相互关系222

第二节血氧223

一、血氧参数223

二、HbO2解离曲线224

三、Po2（0.5 ）或P50224

第三节酸碱平衡与酸碱失衡225

一、酸碱平衡量及其调节225

二、酸碱平衡紊乱——酸碱失衡229

第四节血气分析技术239

一、样品采集与保存239

二、血气分析仪简介239

三、样品测定246

四、结果分析或计算247

五、质量控制251

第十章激素253

第一节肽类及蛋白质类激素253

一、丘脑下部的激素253

二、神经垂体激素256

三、腺垂体激素257

四、胃肠道激素260

第二节非多肽类激素262

一、氨基酸类激素（甲状腺激素）262

二、儿茶酚胺类激素266

三、类固醇激素268

第三节激素代谢产物的测定275

一、体液中激素及其代谢产物的测定275

二、内分泌腺功能的其他试验275

实验10—1 尿液17—羟皮质类固醇（17—OHCS）测定276

实验10—2 尿液17—酮类固醇（17—KS）测定278

实验10—3 3－甲氧基－4－羟基苦杏仁酸（VMA）测定280

第四节激素的放射免疫分析282

一、放射免疫分析的基本原理282

二、建立放射免疫分析的必要条件及实验条件的选择284

三、激素的放射免疫分析289

实验10—4 血清甲状腺素（T4）测定291

实验10—5 血浆胰岛素测定292

实验10—6 血浆醛固酮测定293

四、RIA的剂量反应曲线294

五、RIA的质量控制295

第十一章肝脏功能试验298

第一节胆色素代谢及检验298

一、胆色素的正常代谢298

二、胆色素的异常代谢——黄疸300

三、血清中胆红素301

四、血清胆红素测定301

实验11—1 黄疸指教测定304

实验11—2 血清胆红素定性试验304

实验11—3 血清总胆红素和1分钟胆红素定量测定306

第二节血浆蛋白质与肝功能308

一、血清蛋白测定对肝病诊断的意义308

实验11—4 麝香草酚浊度试验（TTT）309

实验11—5 硫酸锌浊度试验（ZnTT）310

二、血清酶活性测定311

三、病毒性肝炎的抗原—抗体系统312

第三节肝脏的色素排泄功能312

实验11—6 四溴酚酞磺酸钠（BSP）试验312

第四节肝功能试验的选择和评价313

一、肝功能试验的选择313

二、肝功能试验的评价314

第十二章肾脏功能试验315

第一节肾脏的生理功能315

一、尿液的生成315

二、内分泌功能315

第二节非蛋白氮物质316

一、尿素316

二、肌酐317

三、尿酸318

第三节清除或浓缩试验318

一、影响试验结果的因素318

二、肾脏的血流和尿液形成318

三、肾脏功能试验319

实验12—1 尿素氮测定（二乙酰一肟法）320

实验12—2 尿素氮测定（半酶法）321

实验12—3 血清肌酐测定（碱性苦味酸法）323

实验12—4 内生肌酐清除率试验326

实验12—5 血清尿酸测定（Henry氏法）327

实验12—6 尿蛋白醋酸纤维薄膜电泳330

第十三章肿瘤标志物331

第一节概述331

一、肿瘤331

二、恶性肿瘤发生原因331

三、生物致癌因素332

第二节肿瘤标志物334

一、抗原334

二、酶336

三、激素338

四、胺类340

第三节 个别肿瘤的标志物342

第十四章治疗药物监测344

第一节影响血清药物水平的因素344

一、病人合作情况344

二、药物的吸收344

三、蛋白质结合作用345

四、药物的代谢345

五、肾脏的排泄346

第二节药物代谢的动力学347

一、剂量反应曲线347

二、连续多次用药剂量反应曲线347

三、稳定状态347

四、影响动力学的其他因素348

第三节血清药物浓度分析技术349

一、紫外分光光度法和气液色层分析349

二、直接免疫检验方法349

三、药物筛选349

第四节个别药物监测举例350

一、乙醇351

二、水杨酸盐352

三、对乙酰氨基酚352

四、巴比妥352

实验14—1 血清巴比妥的测定354

附录356