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第一章 光谱光度分析技术1

第一节 光谱光度分析的基本原理1

一、光的一般概念1

第一篇1

二、光的电磁理论2

三、发射光谱与吸收光谱3

四、物质结构与光谱的关系3

(一)物质结构与发射光谱的关系3

(二)物质结构与吸收光谱的关系4

(一)定性分析6

第二节 发射光谱分析技术6

一、简介6

(二)定量分析7

二、摄谱仪的基本构造7

(一)电光源7

(二)色散系统8

(三)检测器8

三、火焰光度计8

四、原子荧光光谱仪10

第一节 概述11

第三节 吸收光谱分析技术11

第二章 电泳技术11

第二节 电泳的基本原理12

第三节 影响电泳的因素14

一、电场强度14

二、缓冲液15

三、支持物18

(一)吸附18

(二)电渗18

第四节 电泳的称呼和类别19

(三)支持物的分子筛作用19

第三章 层析技术20

第一节 层析的一般原理和分类20

一、层析的一般原理20

二、层析法的分类21

第二节 吸附层析22

一、吸附等温线23

二、分配系数与保留值24

三、吸附柱层析法25

四、吸附薄层层析法30

一、原理36

第三节 分配层析技术一纸层析法36

二、操作技术37

第四节 反流分布法40

一、基本原理40

二、操作技术42

第五节 离子交换层析43

一、离子交换剂的结构与分类43

二、离子交换树脂的特性49

三、离子交换理论50

四、应用与实例52

第六节 凝胶层析法53

一、基本原理53

二、凝胶55

三、凝胶层析的实验技术58

四、影响凝胶层析的因素59

五、防止微生物污染凝胶的方法63

六、凝胶的再生64

七、凝胶层析法的应用64

第七节 亲和层析法66

一、基本原理66

二、操作71

三、亲和层析法实例78

第四章 临床生化检验的质量控制82

第一节 概念82

一、临床生化检验的质量控制82

二、检验误差82

三、回顾性质量控制的统计学基础83

四、以平均值？±？SD估计变量值的频数分布84

二、控制血清的定值85

三、室内质控允许误差的确定85

一、控制血清的准备85

第二节 室内允许误差的确定和质控图的制作85

四、室内质控图的制作及例题分析86

五、平均值和全距法质控图87

第三节 方法考查提要90

一、精密度试验90

二、准确度试验90

三、比较两种方法的测定均数差异是否显著91

四、比色法标准工作曲线的校正91

第五章 超速离心分析法92

第一节 引言92

一、一般原理92

(一)沉降速度法94

(二)沉降平衡法95

第二节 基本数学理论97

一、沉降系数与分子量测定97

(一)沉降系数97

(二)分子量测定98

二、沉降速度与分子量测定101

(一)浓度测定与平方稀释定律101

(二)分子量测定103

一、油涡轮超速离心机104

第三节 仪器设备104

二、气动超速离心机105

三、电动超速离心机106

四、制备用超速离心机106

第四节 超速离心沉降界面的观察方法108

一、柱面透镜法108

二、光干涉法111

三、光吸收法112

第五节 实验方法113

一、实验溶液的准备113

二、离心管114

三、离心管帽115

四、离心池116

(一)单孔离心池116

(二)双孔离心池116

五、区带离心法117

(一)差速与等密度区带离心法118

(二)密度梯度溶液的制备119

1.直线型密度梯度溶液的配制119

2.指数曲线型密度梯度溶液的配制120

一、牛血清白蛋白沉降系数的测定122

第六节 超速离心实例122

六、区带离心法的分离能力122

二、用差速离心法从鼠肝中提纯核蛋白体、及核蛋白体RNA123

三、用蔗糖梯度离心法分部分离核糖核酸124

第六章 试剂配制126

第一节 概述126

第二节 临床生化检验常用的各种浓度试剂127

一、百分浓度(%)127

二、克分子浓度(M或mol/L)127

三、当量浓度(N)和毫克当量浓度(mEq/L)127

一、配制方法及要求128

第三节 溶液配制128

四、比例浓度128

二、有关浓度的换算132

第七章 玻璃器材的备用138

第一节 玻璃器材的消毒、清洁和存放138

第二节 玻璃量器的使用方法139

一、玻璃量器的种类、构造及用途139

二、玻璃量器的使用规则141

第三节 玻璃量器的校正143

一、滴定管的校正146

二、吸量管的校正147

三、微量吸管的校正148

三、容量瓶的校正148

第八章 药物对生化检验的干扰150

第二篇155

第一章 临床基本操作技能155

第一节 静脉采血155

一、注射器155

二、皮肤消毒155

三、肘前静脉采血155

一、草酸钾156

第二节 抗凝剂及其应用156

五、颈静脉采血156

四、腕背静脉采血156

六、动脉采血156

二、草酸钠157

三、肝素157

四、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)157

五、采血后怎样获取全血，血浆血清157

二、容器158

三、保存方法158

一、收集量158

第三节 尿液标本的采取158

第四节 无蛋白滤液制备159

一、钨酸除蛋白法159

二、三氯醋酸法159

第二章 血液葡萄糖测定160

第一节 概述161

第二节 血液葡萄糖测定161

一、磷钼酸显色法(Folin-吴宪二氏法)161

二、邻甲苯胺法164

三、葡萄糖氧化酶法166

二、操作170

一、原理170

第三节 糖耐量试验170

三、附注171

四、临床意义171

第三章 血液蛋白质及非蛋白氮测定172

第一节 概述172

第二节 血清总蛋白、白蛋白、球蛋白测定174

一、微量定氮法174

二、双缩脲法176

第三节 非蛋白氮测定179

一、纳氏比色法179

二、次亚溴酸钠法182

二、磷钨酸一氰化钠法184

第四节 尿素氮测定184

一、二乙酰一肟法185

二、脲酶法187

第五节 肌酐测定188

第六节 肌酸测定190

第七节 尿酸测定192

一、磷钨酸钠显色法192

三、磷酸三钠法196

第八节 血氨测定197

第四章 血脂测定202

第一节 概述202

一、硫磷铁法204

第二节 血清总胆固醇测定204

二、硫酸-邻苯二甲醛法206

三、硫酸-醋酐法207

第三节 血清甘油三酯测定208

一、正庚烷-异丙醇-乙酰丙酮法(简易快速法)209

二、醇-醚-氯仿提取法211

第四节 血清β脂蛋白测定(肝素比浊法)214

第五节 血清总脂测定216

第六节 血清磷脂测定218

一、高氯酸消化法218

二、氨基萘酚磺酸法220

第七节 血清游离脂肪酸测定221

第八节 酮体测定223

第一节 概述226

第五章 无机元素测定226

第二节 血清钾测定227

四苯硼钠比浊法227

附：尿钾测定231

第三节 血清钠测定232

一、焦性锑酸钾比浊法232

二、醋酸双氧铀镁-亚铁氰化钾间接比色法233

第四节 血清钾、钠火焰光度法236

一、直接法236

二、内标法238

硝酸汞滴定法240

第五节 氯化物测定240

第六节 血清钙测定243

一、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)滴定法244

二、邻甲酚酞络合剂比色法246

附：尿钙测定(EDTA-Na2滴定法)249

第七节 血清无机磷测定250

一、硫酸亚铁磷钼篮比色法250

二、氨基萘酚磺酸磷钼篮比色法253

附：尿无机磷测定(硫酸亚铁磷钼篮比色法)254

第八节 铁测定255

一、血清铁的测定(双联吡啶比色法)257

二、血清(浆)总铁结合力测定259

三、全血铁测定(硫氰酸铁比色法)261

第九节 血清镁测定263

达旦黄比色法264

第十节 铜测定266

一、血清铜二乙基二硫代氨基甲酸钠比色法267

二、尿铜测定(尿酮二乙基二硫代氨基甲酸钠比色法)268

三、血清铜二苯基羰酰二肼比色法269

第十一节 血清锌测定271

吡啶偶氮萘酚比色法272

第六章 血清酶类测定274

第一节 概述274

第二节 转氨酶测定275

一、谷丙转氨酶(GPT)测定276

二、谷草转氨酶(GOT)测定278

一、碱性磷酸酶测定280

第三节 磷酸酶测定280

二、酸性磷酸酶测定286

第四节 淀粉酶测定287

第五节 胆碱酯酶测定289

一、胆碱酯酶测定289

二、全血胆碱酯酶测定292

第六节 磷酸肌酸激酶测定294

第七节 5′-核苷酸酶测定297

第八节 γ-谷氨酰转肽酶测定299

第九节 单胺氧化酶测定302

第十节 乳酸脱氢酶测定304

第十一节 醛缩酶测定307

第七章 肝脏功能试验311

第一节 和蛋白质有关的肝功能试验311

一、血清蛋白定量测定与电泳311

二、血清浊度和絮状试验313

三、甲胎蛋白试验321

五、血氨测定322

四、和某些凝血因子有关的试验322

第二节 和脂类代谢有关的试验323

一、血清总胆固醇测定324

二、卵磷脂胆固醇酰基移换酶的测定324

第三节 和肝脏病有关的血清酶类试验324

一、反映肝细胞损伤的酶类324

二、反映胆道梗塞的酶类326

第四节 有关胆色素代谢的肝功能试验328

一、血清胆红素测定328

三、反映肝纤维化的酶类328

二、尿中胆红素、胆素原及胆素的测定337

一、血清磺溴酞钠潴留量测定338

第五节 有关生物转化与排泄的肝功能试验338

二、靛青绿(ICG)排泄试验343

第六节 肝功能试验的选择343

一、肝脏功能检查的原则344

二、对某些肝功能试验在临床应用的评价344

三、肝脏功能试验的选择349

第八章 内分泌测定350

第一节 尿17-酮类固醇测定350

第二节 尿17-羟类固醇测定350

一、正丁醇提取法353

二、氯仿-正丁醇-乙醇提取法355

第三节 尿中儿茶酚胺测定356

第四节 3-甲氧基-4-羟苦杏仁359

酸测定362

第五节 血清蛋白结合碘测定362

第九章 血液气体分析及pH测定364

第一节 血液气体和酸碱平衡紊乱诊断的基本概念364

二、血液中含氧量的计算367

一、气体分压及其在血液中溶解量的计算367

三、血液中CO2、Tco2和HCO？含量及pH的计算368

四、酸 平衡指标369

第二节 血标本的采集和保存373

一、密闭式动脉或静脉取血法373

二、毛细血管血的采取法373

三、血液标本的贮存374

第三节 血氧测定法375

一、氧分压测定--氧分压电极法375

二、血氧饱合度测定378

第四节 血液二氧化碳测定397

一、二氧化碳分压测定397

二、血浆碳酸氢根测定(滴定法)403

三、血浆总二氧化碳测定(量气法)404

一、血浆pH计法411

第五节 血液pH测定411

二、酚红比色测定法414

第六节 各项酸碱平衡诊断指标的计算417

一、pH-Pco2法417

二、单-CO2气平衡法418

三、两种CO2气平衡法418

第七节 血液气体分析和PH测定的临床意义422

一、正常范围和生理变动422

二、呼吸功能诊断423

三、酸碱平衡诊断425

第十章 临床电泳430

第一节 血清蛋白质电泳430

一、血清蛋白质纸电泳法430

二、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳433

第二节 血清脂蛋白电泳435

一、醋酸纤维薄膜电泳435

二、琼脂糖电泳法438

三、预染脂蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(圆盘电泳)439

第三节 血清乳酸脱氢酶(LDH)同功酶电泳445

第四节 对流免疫电泳448

一、酸碱指示剂449

附录：449

二、生化实验常用缓冲液的配制方法451

三、市售常用酸碱的浓度455

四、实验室工作常用的度量衡单位455

五、某些溶剂的沸点、比重及介电常数458

六、乙醇的用水稀释法(15.6℃时)459

七、原子量表460

三、血氧含量测定-量气法784