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上篇 生化检验基本知识与基本操作1

第一章 生化实验室工作守则与安全防护措施1

第一节 生化实验室工作守则1

第二节 生化实验室的安全与防护1

第二章 玻璃仪器4

第一节 生化实验常用玻璃仪器的种类、规格及使用4

第二节 玻璃仪器的洗涤9

第三节 玻璃量器的校正11

第四节 玻璃简易吹制技术16

第三章 生化检验基本操作技术23

第一节 混匀、沉淀与过滤23

第二节 加热与冷却26

第三节 蒸发与结晶26

第四节 蒸馏与萃聚27

第五节 一些与实验室有关的小技术30

第四章 化学试剂32

第一节 化学试剂命名的基本知识32

第二节 化学试剂的品级及包装规格33

第三节 pH试纸的规格和种类35

第四节 干燥剂与制冷剂36

第五节 危险品分类37

第六节 化学试剂的保管及预防变质的方法39

第五章 试剂的配制与使用45

第一节 常用试剂浓度表示法45

第二节 常用试剂浓度计算公式46

第三节 常用试剂的恒重方法50

第四节 指示剂52

第五节 试剂的精制58

第六节 溶液的配制方法60

第七节 试剂级水62

第八节 试剂的使用规则64

第六章 pH与缓冲剂65

第一节 水的电离65

第二节 pH值65

第三节 pH值的计算66

第四节 同离子效应67

第五节 缓冲剂及其组成68

第六节 缓冲溶液pH值及离子强度的计算69

第七节 常用缓冲溶液的配制70

第八节 两性离子(Zwitterion)缓冲剂78

第七章 实用生化分析技术80

第一节 比色法80

第二节 紫外及可见分光光度法84

第三节 荧光分析法91

第四节 散射测定法94

第五节 火焰光度法95

第六节 离子选择性电极法96

第七节 生化自动分析仪107

第八节 离心分离技术109

第九节 层析法116

第十节 电泳法135

第八章 实验误差144

第一节 准确度与精密度144

第二节 误差的种类145

第三节 分析结果的表示方法147

第四节 提高分析结果准确度的方法148

第五节 极端值的舍弃、有效数字和计算规则149

第九章 生化检验中常用的一些统计学知识151

第一节 生化检验中常用统计指标的基本概念和名词术语151

第二节 平均值、标准差和标准误的计算及其应用153

第三节 百分位数统计法153

第四节 显著性测验158

第五节 相关与回归162

第十章 临床化学质量控制和方法学评价173

第一节 预防性质控与回顾性质控173

第二节 生化检验质量控制的五个阶段175

第三节 室内质量控制179

第四节 室间质量评价187

第五节 临床化学常规方法的选择和评价194

第十一章 量与单位205

第一节 计量单位名词术语205

第二节 国际单位制的组成206

第三节 SI单位在医学实验室中的应用207

第十二章 计算器的功能和应用210

第一节 计算器的基本构造210

第二节 计算器的类型和功能范围212

第三节 计算器的选择214

第四节 计算器的按键及其作用214

第五节 计算器的普通运算功能221

第六节 计算器的基本统计分析运算226

第七节 自编程序的方法236

第八节 定积分计算244

第十三章 诊断试验的选择与评价245

第一节 诊断试验的特性与选择原则245

第二节 诊断试验的预断值248

第三节 诊断试验界点的确定251

第四节 诊断试验综合评价的指标258

第五节 多指标计量诊断的方法262

第六节 提高诊断试验临床价值的策略268

第七节 新建诊断试验的统计学要求270

第八节 新报道诊断试验的评价问题272

下篇 临床生化检验方法277

第十四章 血液标本的采集和处理以及影响生化检验结果的某些生理因素277

第一节 血液标本的采集277

第二节 血液标本的抗凝与保存278

第三节 无蛋白血滤液的制备280

三氯醋酸法280

钨酸法281

不溶血无蛋白滤液法281

硫酸锌一氢氧化钡法281

第四节 影响生化检验结果的生理因素282

第十五章 血红蛋白的分离与鉴定技术286

第一节 血红蛋白的生物化学286

第二节 血红蛋白溶液的制备289

冻融溶血法289

CDC推荐法290

第三节 镰变试验291

第四节 血红蛋白溶解度测定291

改良Itano定量法291

定性过筛法292

第五节 碱变性试验293

Singer法293

Betke法295

第六节 Hb F血片酸洗脱试验296

第七节 血红蛋白电泳297

醋酸纤维薄膜电泳297

中性pH用于Hb H和Hb Bart s电泳301

柠檬酸盐琼脂电泳302

淀粉板电泳McCoo Leikin法304

淀粉胶电泳Smithies法305

第八节 碱性珠蛋白链电泳306

第九节 酸性珠蛋白链电泳308

第十节 Hb A2定量309

醋纤膜洗脱法309

微量柱层析法310

第十一节 不稳定血红蛋白检查311

异丙醇试验311

热稳定试验312

包涵体检查313

第十二节 高铁血红蛋白定量测定314

第十三节 血浆游离血红蛋白测定315

Crosy-Furth法315

第十四节 糖化血红蛋白测定316

离心层析法316

微柱层析法317

第十六章 卟啉、胆红素、胆酸以及肝排泄染料测定319

第一节 卟啉及其前体测定319

尿液尿卟啉测定319

尿液粪卟淋测定322

血液卟啉测定323

尿液δ-氨基-γ酮戊酸(ALA)测定324

尿液卟胆原定性测定324

第二节 胆红素测定326

改良J-G法327

改良Malloy-Evelyn法(甲醇法)329

胆红素氧化酶法329

新生儿总胆红素直接分光光度测定法330

第三节 胆汁酸测定331

血清中总胆汁酸酶法331

3α-羟基胆汁酸酶法332

血清中结合胆酸高效液相色谱法333

第四节 靛氰绿排泄试验334

第十七章 血清脂类测定336

第一节 血清总脂质测定337

第二节 血清甘油三酯测定338

乙酰丙酮法(改良Fletcher法)339

甘油磷酸氧化酶法(一步终点比色法)340

甘油磷酸氧化酶法(二步酶法)341

第三节 血清总胆固醇测定342

硫磷铁法342

修改的LRC法344

酶法测定(CHOD-PAP法)345

第四节 血清游离胆固醇及胆固醇酯测定347

第五节 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定348

第六节 高密度脂蛋白胆固醇亚组分测定349

第七节 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定350

第八节 血清磷脂测定351

第九节 血清脂浊度试验352

第十节 血清脂蛋白电泳353

酯酸纤维薄膜电泳353

琼脂糖电泳355

预染脂蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳356

第十一节 脂蛋白X测定358

第十二节 载脂蛋白测定359

apo AI、B测定(免疫透射比浊法)359

LP(a)测定361

第十三节 血清过氧化脂质测定362

硫代巴比妥酸比色法362

第十四节 血脂分析的临床意义363

第十八章 酶类测定369

第一节 酶活力测定的基本知识369

第二节 血清丙氨酸氨基移换酶测定374

赖氏(Reitman-Frankel)比色法374

连续监测法377

第三节 血清ALT同工酶测定378

第四节 血清天门冬氨酸氨基移换酶测定379

赖氏比色法379

连续监测法381

第五节 血清AST同工酶测定382

第六节 血清乳酸脱氢酶测定383

比色法383

连续监测法(LDH-P法)384

第七节 血清LDH同工酶测定386

琼脂糖凝胶电泳分离LDH同工酶386

圆盘电泳分离LDH同工酶389

第八节 血清碱性磷酸酶测定391

醚酸苯二钠法391

磷酸百里酚酞法393

连续监测法394

第九节 血清碱性磷酸酶同工酶测定396

化学剂处理及耐热试验396

电泳分析法397

第十节 血清酸性磷酸酶测定398

磷酸百里酚酞法398

前列腺酸性磷酸酶测定400

第十一节 血清γ-谷氨酰转移酶测定401

重氮试剂法401

连续监测法403

第十二节 血清γ-GT同工酶测定404

第十三节 血清肌酸激酶测定405

肌酸显色法405

酶偶联法407

第十四节 血清CK同工酶测定408

Mercer柱层析法409

琼脂糖电泳法411

免疫抑制法413

第十五节 淀粉酶测定413

碘淀粉比色法414

染色淀粉法415

酶偶联法416

第十六节 血清脂肪酶测定417

第十七节 血清α-羟丁酸脱氢酶测定419

Rosalki比色法419

速率法420

第十八节 胆碱酯酶测定421

速率法422

纸片法424

第十九节 血清精氨酸酶测定424

第二十节 血清5′-核苷酸酶测定426

第二十一节 血清鸟氨酸氨基甲酰转移酶测定428

第二十二节 血清单胺氧化酶测定430

第二十三节 血清磷酸已糖异构酶测定431

第二十四节 血清醛缩酶测定433

第二十五节 亮氨酸氨基肽酶测定435

第二十六节 精氨酰琥珀酸裂解酶测定437

第二十七节 血清腺苷脱氨酶测定438

第二十八节 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定439

高铁血红蛋白还原法440

连续监测法441

第二十九节 山梨醇脱氢酶测定442

第三十节 血清谷氨酸脱氢酶测定444

第三十一节 血清铜氧化酶(铜蓝蛋白)的测定445

第三十二节 胰蛋白酶测定446

第三十三节 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定447

第三十四节 血清α-L-岩藻糖苷酶测定449

第三十五节 血清超氧化物歧化酶测定450

第三十六节 各种疾病时血清酶的变化452

第十九章 无机离子测定456

第一节 血清钾钠测定456

火焰光度法456

离子选择电极法(ISE)457

冠醚化合物比色法459

第二节 血清氯化物测定459

硝酸汞滴定法459

离子选择电极法462

硫氰酸汞比色法462

氯测定仪法463

第三节 血清钙测定463

EDTA络合滴定法464

邻-甲酚酞络合酮直接比色法467

原子吸收分光光度法469

偶氮胂Ⅲ比色法470

离子钙测定470

第四节 血清无机磷测定471

钼兰法(ANS比色法)471

孔雀绿直接显色法473

紫外分光光度法474

第五节 血清镁测定474

甲基麝香草酚蓝比色法474

CLG比色法476

原子吸收分光光度法477

第六节 血清铁测定477

双吡啶法477

亚铁嗪比色法480

深二氮杂菲比色法480

第七节 血清铁结合力测定481

第八节 血清铜测定482

双环己酮草酰二脘比色法482

原子吸收分光光度法484

第九节 血清锌测定484

5-Br-PADAP比色法484

原子吸收分光光度法485

第二十章 血清蛋白质测定487

第一节 凯氏定氮487

第二节 血清总蛋白测定489

双缩脲法489

双缩脲法标化测定491

折射测定法492

第三节 血清白蛋白测定492

溴甲酚绿法(一)492

溴甲酚绿法(二)494

第四节 血清丙种球蛋白测定495

第五节 血清粘蛋白测定495

第六节 血清蛋白电泳496

醋酸纤维薄膜电泳496

第七节 血浆纤维蛋白原测定500

亚硫酸钠法500

热沉淀比浊法501

第八节 血清冷球蛋白测定501

冷球蛋白定性测定501

冷球蛋白定量测定502

第九节 血清结合珠蛋白测定502

第二十一章 氨基酸及其他含氮物质测定504

第一节 氨基酸总量测定504

2、4-二硝基氟苯(DNFB)显色法504

β-萘醌磺酸钠法505

第二节 血浆(清)和体液中氨基酸层析法506

单向纸层析法506

单向薄层层析法507

双向薄层层析法507

高效液相色谱法509

第三节 个别氨基酸及其代谢物测定的简单筛选试验509

三氯化铁试验509

2、4-二硝基苯肼试验510

尿液对-羟丙酮酸定性试验(米伦反应)510

亚硝基萘酚试验510

尿液尿黑酸定性试验510

尿液黑色素定性试验511

尿液胱氨酸及同型胱氨酸定性测定511

第四节 个别氨基酸及其代谢产物定量测定512

尿中胱氨酸定量测定512

血清苯丙氨酸测定512

血清酪氨酸测定514

血清5-羟色胺测定515

羟脯氨酸测定515

血清(浆)游离色氨酸测定517

第五节 血清(浆)尿素氮(BUN)测定517

二乙酰一肟显色法518

脲酶-波氏比色法518

酶偶联速率法519

第六节 尿酸测定520

磷钨酸还原法520

尿酸酶-紫外分光法521

尿酸酶-过氧化物酶偶联法521

第七节 血清(浆)肌酐测定522

苦味酸法522

不除蛋白血清(浆)肌酐测定法523

肌氨酸氧化酶法524

谷氨酸脱氢酶法524

高效液相色谱内标法525

第八节 血氨测定525

波氏反应直接显色法526

离子交换树脂-波氏反应法527

谷氨酸脱氢酶法527

第二十二章 碳水化合物测定529

第一节 血清葡萄糖测定529

氧化酶法529

邻甲苯胺法531

已糖激酶法532

第二节 血液乳酸测定533

血浆乳酸测定533

全血乳酸测定534

第三节 全血丙酮酸测定536

分光光度法536

2，4-二硝基苯肼显色法537

第四节 血浆酮体定性试验538

第五节 血清胡萝卜素测定538

第六节 全血抗坏血酸测定539

第二十三章 血液pH及气体分析541

第一节 血液酸碱平衡的指标及其意义541

第二节 血液酸碱平衡测定545

第三节 血浆二氧化碳结合力测定555

量积法555

酸碱滴定法559

第四节 血液一氧化碳定性试验561

改良荷泼(Hoppe)与赛勒(Sayler)法561

赛逸(Syer)与叶(Yants)氏法561

第二十四章 尿液生化检验563

第一节 尿液标本的收集与保存563

第二节 尿中尿素氮测定563

二乙酰一肟法563

次亚溴酸钠法564

第三节 尿中肌酐测定565

柱层析法565

苦味酸法566

第四节 尿中尿酸测定567

第五节 尿中肌酸测定567

柱层析法567

苦味酸法567

第六节 尿中钾钠测定568

火焰光度法568

〔附〕唾液中钠钾比率的测定569

第七节 尿中氯化物测定569

第八节 尿中钙测定570

EDTA络合滴定法570

第九节 尿中无机磷测定571

氨萘磺酸显色法571

米吐尔直接显色法571

第十节 尿中葡萄糖测定572

第十一节 尿中尿胆素原测定572

第十二节 尿中粘多糖酸定性试验573

第十三节 尿中肌红蛋白定性试验573

第十四节 尿中淀粉酶测定574

碘比色法574

〔附〕十二指肠液淀粉酶测定(Wohlgemuth法)574

第十五节 尿中总蛋白定量测定575

双缩脲法575

丽春红S法575

考马斯亮蓝法576

第十六节 尿中雌三醇(E3)测定577

第十七节 尿中17-酮类固醇测定579

第十八节 尿中17-羟皮质类固醇测定581

第十九节 尿中5-羟吲哚醋酸测定583

5-羟吲哚醋酸定性过筛试验583

5-羟吲哚醋酸定量测定(Goldenberg改良法585

第二十节 尿中黄体生成素测定586

乳胶凝集抑制试验法586

第二十一节 尿中儿茶酚胺及其代谢产物测定587

尿中儿茶酚胺荧光定性试验589

尿中儿茶酚胺定量测定590

尿中VMA斑点试验592

尿中VMA定量测定594

尿中间甲基肾上腺素测定595

第二十二节 尿中微量白蛋白测定597

第二十五章 结石成分分析599

第一节 概述599

第二节 结石成分的化学定性试验600

第三节 胆石成分的定量分析602

胆石中胆固醇测定603

胆石中钙测定(EDTA络合滴定法)603

胆石中胆红素测定604

胆石中胆绿素测定605

胆石中磷脂测定605

第四节 胆汁中主要成分的分析607

胆汁中胆酸测定607

胆汁中磷脂测定607

胆汁中无机磷测定608

胆汁中钙测定(EDTA络合滴定法)609

胆汁中胆红素测定610

胆汁保温后沉淀中胆红素测定611

胆汁中β-葡萄糖醛酸苷酶测定611

第二十六章 脑脊液生化检验613

第一节 脑脊液循环及其功能、化学成分、参考值和标本送检613

第二节 脑脊液蛋白测定614

酚试剂法614

比浊法615

邻苯三酚红钼铬合显色法615

脑脊液蛋白电泳法616

免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)测定617

第三节 脑脊液葡萄糖定量测定618

第四节 脑脊液氯化物测定618

硝酸汞滴定法618

第五节 色氨酸试验619

第六节 脑脊液酶类测定619

第二十七章 粪便生化检验621

第一节 粪胆原测定621

第二节 粪内脂肪测定622

脂肪总量测定622

结合脂肪酸测定622

游离脂肪酸测定623

中性脂肪测定623

脂肪平衡试验623

第二十八章 与生化检验有关的临床实验625

第一节 尿素廓清试验625

第二节 葡萄糖耐量试验627

标准试验法(口服法)627

Exton-Rose糖耐量试验628

静脉葡萄糖耐量试验628

婴儿糖耐量试验629

第三节 半乳糖耐量试验630

第四节 胰岛素耐量试验630

第五节 可的松-葡萄糖耐量试验630

第六节 D860试验630

第七节 淀粉耐量试验631

第八节 克罗保三氏水试验631

第九节 促肾上腺皮质激素试验632

第十节 地塞米松抑制试验633

第十一节 低钙试验633

第十二节 钙耐量试验634

快速滴注钙耐量试验634

静脉滴注钙耐量试验634

第十三节 磷廓清试验634

第十四节 磷重吸收试验635

第十五节 内生性肌酐廓清试验635

第十六节 右旋木糖吸收试验636

第二十九章 治疗药物监测637

第一节 血药浓度测定方法的选择637

第二节 治疗药物监测的程序639

第三节 血药浓度测定640

血清阿米替林、去甲替林、丙咪嗪、去甲丙咪嗪、多虑平和去甲多虑平同时测定(高效液相色谱法)640

血清茶碱和咖啡因测定(高效液相色谱法)641

血清利多卡因及其代谢产物、慢心律、双异丙吡胺和奎尼丁同时测定(高效液相色谱法)641

血清苯妥因、苯巴比妥、可马西平和乙琥胺测定(高效液相色谱法)642

血清乙胺碘呋酮及其代谢产物测定(高效液相色谱法)643

血清奎尼丁测定(荧光分光光度法)644

血清双丙异吡胺测定(高效液相色谱法)644

血清普鲁卡因酰胺及其代谢产物测定(高效液相色谱法)645

血清普鲁卡因酰胺测定(比色法)645

血清庆大霉素测定(高效液相色谱法)646

血清氯霉素测定647

血清丙戊酸测定(气相色谱法)648

全血环孢霉素A测定(高效液相色谱法)648

血浆甲氨蝶呤测定(高效液相色谱法)649

血清小诺霉素测定(高效液相色谱法)649

第三十章 基因诊断技术651

第一节 概述651

第二节 基因探针技术655

第三节 聚合酶链式反应技术671

第四节 相关知识与实验室要求676

附录一 药物对生化检验的干扰685

附录二 生化检验参考值692

附录三 临床生化检验常用缩写符号698

附录四 各种氨基酸的缩写703

附录五 希腊字母读音表703

附录六 原子量表704

附录七 透光度、吸光度换算表705

附录八 常量、微量和超微量度量衡单位名称表708

附录九 弱电解质的电解常数709

附录十 在各种温度(℃)下某些物质在水中的溶解度710

附录十一 常用化学试剂物理常数表712