《表1 本研究引物序列:从江县鲤爆发性死亡病例实验室诊断》

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《从江县鲤爆发性死亡病例实验室诊断》


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参照文献[5],设计合成CEV外膜蛋白基因特异性引物(表1)。取上述提取的核酸样本为模板进行两步PCR检测,反应体系均为25μL。第一步PCR检测的反应程序:94℃预变性2 min,94℃变性30 s、58℃退火30 s、72℃延伸50 s,共35个循环;72℃终延伸5 min;第二步PCR检测是以第一步PCR产物为模板,反应程序:94℃预变性3 min;94℃变性20 s、58℃退火20 s、72℃延伸20 s,共35个循环;72℃终延伸5 min。取PCR产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,观察结果。