《表1 毛华菊CRY2基因分离及表达分析时所用的引物序列信息》

《表1 毛华菊CRY2基因分离及表达分析时所用的引物序列信息》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《毛华菊CvCRY2基因的克隆、生物信息学及表达分析》


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利用DNAMAN 7.0软件进行序列拼接以获得各基因的cDNA全长。为保证拼接得到的c DNA全长的正确性,在序列5'UTR和3'UTR处设计特异性引物(表1),以扩增各基因的cDNA全长序列。将测序结果与NCBI数据库中的同源序列及现有的毛华菊转录组中获得的CRY2序列进行比对,并对毛华菊CvCRY2蛋白结构域进行预测。利用Protparam在线软件计算氨基酸理化性质,各项指标包括:氨基酸数目、分子量、理论等电点、分子式和不稳度指数;利用SMART在线软件对CvCRY2蛋白氨基酸序列进行功能域预测和分析;在NCBI数据库中查找不同物种中CvCRY2基因的同源序列,利用MEGA5.0软件邻接算法,自检举1 000次,构建系统进化树;通过在线Proscale分析并预测蛋白亲/疏水性;利用SOPMA对CvCRY2蛋白二级结构进行预测。