《表2 大豆遗传转化中使用的培养基及成分》

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《利用CRISPR/Cas9技术创制大豆高油酸突变系》

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采用农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法构建大豆转基因材料[32]，选用大豆品种H3为受体材料，实验中用到的培养基见表2。利用氯气对大豆表面灭菌，在无菌超净工作台中，将大豆种子接种于萌发培养基上，16 h/8 h（光/暗），温度为25℃，湿度为60%的培养室培养1～3 d后，在子叶节处用手术刀片创造伤口，用农杆菌侵染液（OD650 nm≈0.6），在28℃的摇床中，侵染30 min。随后，将子叶放于表面附有灭菌滤纸的共培养培养基中，25℃，16 h/8 h光暗条件下共培养4d，转移B5芽诱导培养基诱导不定芽。4周后，不定芽经芽伸长培养基培养，培养条件为25℃，16 h/8 h光暗周期。待其伸长大约达到5～7 cm时，再将其转入生根培养基生根，根系健壮后移到土里，获得转基因植株。