《表1 预培养时间对马铃薯遗传转化的影响》

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《马铃薯遗传转化体系的优化建立及其主要影响因素》


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前人研究指出外植体预培养通过调整其生理状态,促进细胞分裂,使受体细胞处于转化感受态,易整合外源基因,从而提高转化效率(郑秀芳等,2005;朱英等,2013)。研究表明对外植体预培养2 d的愈伤组织诱导率和芽分化率最高,未进行预培养的外植体褐化死亡率明显较高。而预培养2 d和3 d的愈伤组织诱导率和外植体上芽分化率之间的差异不大,相对稳定。而预培养5 d的愈伤诱导率和芽分化率明显降低(表1),说明外植体预培养时间过长会影响外植体的遗传转化效率,可能后期细胞的分裂能力有所下降。预培养时间过长导致伤口愈伤组织开始形成,影响到农杆菌对伤口处的侵染,导致转化率降低,因此未预培养或预培养时间过长,都会影响到外植体的遗传转化。未经预培养的外植体经过农杆菌侵染后死亡率较高,本实验最终选择外植体预培养时间为2 d。