表5 不同共培养时间对转化的影响

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表5 不同共培养时间对转化的影响图表

表5 不同共培养时间对转化的影响
注:邓肯氏新复极差测验,不同字母表示差异达极显著水平(P=0.01)Note:Different letters mean significantly different at the 0.01 level by Duncan’s multiple range test
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以PMI为选择标记基因的雪柑遗传转化体系的优化中,以PMI为选择标记基因的雪柑遗传转化体系的优化中,农杆菌对植物外植体进行侵染时,必须在伤口部位存活16 h以上,才能进行T-DNA的转移,此期间涉及农杆菌向受伤部位的附着、Vir区基因的诱导活化及T-DNA的转移整合[3]。在黑暗中共培养适当的时间能提高不定芽的再生效率和转化效率,对共培养时间的优化结果如表5所示:共培养2 d的抗性芽分化率只有5.3%,其原因为培养时间过短,阻碍了T-DNA的有效转移;共培养3 d的分化率为21.6%;共培养4 d的分化率最高达45.1%;而共培养5 d时外植体出现大量的褐化死亡,其原因是农杆菌过度生长所致。从这个结果来看,共培养时间4 d是最佳的。

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