《表2.荧光定量PCR所需引物》

《表2.荧光定量PCR所需引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《不同盐度胁迫下杜氏盐藻全转录组测序及注释》


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基因差异表达采用荧光定量PCR技术。荧光染料采用SYBR Green,方法流程见[20]。简言之,荧光定量PCR采用的仪器为ABI 7500 Fast real-time PCR system(Applied Biosystems)。反应体系包含:1×Super Real PreMix(Tiangen),100 ng cDNA模板,0.3 mol/L引物和1×ROX荧光染料。内参为Actin。反应程序为:95°C 5 min,35个循环(95°C20 s,58°C 35 s,72°C 40 s,65°C 20 s),最后溶解曲线温度设定保证能扩增出单一的PCR产物。PCR引物见表2。