《表1 荧光定量PCR所需引物》

《表1 荧光定量PCR所需引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《外源茉莉酸甲酯对UV-B胁迫下颠茄生物碱积累及TAs代谢途径调控的机制探究》


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按照Biospin多糖多酚植物总RNA提取试剂盒使用说明提取总RNA。按照Prime Script RT reagent Kit with g DNA Eraser (Perfect Real-time)说明书反转录颠茄根、叶RNA,合成用于荧光定量所需的c DNA模板。参照NCBI上公布的序列及强玮等[20-21]的引物序列设计PGK、PMT、TRI和H6H基因引物,参照Qiu等[22]的引物序列设计PPAR基因引物,由英潍捷基(上海)贸易有限公司合成引物(表1)。以反转录得到的c DNA为模板,使用Hieff q PCR SYBR Green Master Mix (High Rox Plus)试剂盒进行荧光定量PCR。以PGK为内参基因,内参和样本基因分别设3个重复和1个阴性对照,均以内参基因作为标准进行相对定量,采用2-ΔΔCt法计算各基因的相对表达量。