《表2 不同表达方式对TGase酶活的影响》

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《拉达克轮丝菌TGase在大肠杆菌中的分子改造》

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研究表明前导肽可以使TGase正确折叠，但是前导肽的存在抑制了TGase和底物的结合，因此必须切掉前导肽才能使TGase发挥功能。根据Liu等的研究结果构建了两种表达模式proTG-22b和pro-pelB-TG-22b[12]。第1种表达方式中，前导肽和TGase融合表达，被信号肽输送到周质空间，再通过周质渗透分泌到胞外；在第2种表达方式中，前导肽和TGase分别被信号肽输送到周质空间，在周质空间中前导肽帮助TGase正确折叠使TGase形成活性形式。分别检测这两种表达模式在胞内外的酶活（表2），发现前导肽和TGase共表达的形式（pro-pelB-TG-22b）在胞内表现出较高的酶活，比酶活达到37.71 U/mg，是第1种表达方式的3.06倍。这种表达方式的优点是TGase直接表现为活性形式，且不需要后期切除N端前导肽，这也为工业化生产提供了便利。