《表4 突变对共表达TGase酶活的影响》

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《拉达克轮丝菌TGase在大肠杆菌中的分子改造》

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在融合表达基础上构建的突变体AAA-proTG-22b比酶活相较于原始表达方式提高了14.05%，但是依然远低于共表达模式。为了得到更高的酶活，在共表达的基础上做了与融合表达相同位点的突变，测定TGase酶活（表4）。与融合表达突变不同的是，将TGase N端前3个氨基酸DSD突变为AAA得到的突变体（AAA-pelB-TG-22b），比酶活不仅没有提高，反而仅为原始共表达模式的56.4%。根据Liu等[12]的研究，在共表达模式中前导肽和TGase分别被pelB信号肽输送到大肠杆菌的周质空间，在周质空间中前导肽帮助TGase正确折叠，使其具有活性。猜测这种突变形式可能不利于前导肽帮助TGase在周质空间中正确折叠，以至于活性降低。