《表3 突变对融合表达TGase酶活的影响》

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《拉达克轮丝菌TGase在大肠杆菌中的分子改造》

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虽然采用前导肽和TGase共表达的形式（pro-pelB-TG-22b）可以直接得到有活性的TGase，但大部分积累在胞内。Chen等对来自吸水链霉菌TGase的N端区域的前4个氨基酸DAAD进行缺失突变，同时将第5位氨基酸E突变为D，得到的突变体Del1-4/E62D比酶活为野生酶的1.8倍[16]。因此我们根据Chen等的研究在第1种表达模式的基础上构建了3种突变体，将TGase N端前3个氨基酸DSD突变为3个丙氨酸（AAA-proTG-22b）或全部缺失（DSD-proTG-22b），将N端第4个氨基酸E突变为D（ED-proTG-22b）。通过比较胞内外的酶活（表3），发现突变体AAA-proTG-22b胞内外酶活都明显提高，相较于原始表达方式比酶活提高了14.05%。而其他两种突变体比酶活显著降低，但胞外酶活并未受到影响，这可能是由于突变增加了TGase蛋白的分泌量，具体机制还需要后期的研究。