《表1 实验所用引物：拉达克轮丝菌TGase在大肠杆菌中的分子改造》

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《拉达克轮丝菌TGase在大肠杆菌中的分子改造》

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根据基因组信息设计引物PTG-F和PTG-R（表1）以S.ladakanum B1基因组DNA为模板，使用Prime STAR DNA聚合酶扩增含有前导肽区的TGase（pro-TGase）的编码基因。PCR反应体系（50μL）:模板50 ng，2×PrimeSTAR 25μL，上、下游引物各400 nmol/L，添加ddH2O至50μL。PCR反应条件:94°C 5 min；94°C 30 s，50°C 30 s，72°C 50 s，30个循环；72°C 10 min。将基因片段采用1%的琼脂糖凝胶回收，连接至pMD19-T载体，得到的质粒pro TG-19T由北京睿博公司测序。