《表1 实验所用引物：Uegpa3基因在菰黑粉菌二型态转换中的作用》

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《Uegpa3基因在菰黑粉菌二型态转换中的作用》

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根据本实验室前期获得的菰黑粉菌转录组数据库（Ye et al.，2017），设计扩增Uegpa3基因的特异性引物（表1）。使用十六烷基三甲基溴化铵法（hexadecyltrimethylammonium bromide，CTAB）提取菰黑粉菌基因组DNA，用Uegpa3特异性引物扩增Uegpa3基因。使用真菌RNA抽提纯化试剂盒（生工，上海）提取菰黑粉菌总RNA，采用南京诺唯赞生物科技有限公司的反转录试剂盒合成cDNA，以c DNA为模板进行普通PCR扩增。PCR反应体系：10×PCR buffer（Mg2+plus）5μL，dNTP（2.5 mmol/L）4μL，Uegpa3-cF（10 mmol/L）2μL，Uegpa3-cF（10 mmol/L）2μL，模板1μL，LA Taq（5 U/μL）0.5μL，ddH2O 35.5μL。反应程序：94℃3 min；94℃30 s，58℃30 s，72℃1 min 30 s，34个循环；72℃10 min；4℃保温。获得的产物用1%琼脂糖凝胶检测后将产物用凝胶DNA小量回收试剂盒（生工，上海）回收，连接T载体并转化大肠杆菌感受态，挑取阳性克隆送杭州有康生物科技公司测序。