《表2 RT-qPCR引物序列》

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《高效诱导人胚胎干细胞分化为表达生殖功能调控相关基因的下丘脑神经细胞》

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收取hESCs和分化Day 12、34的细胞样本，采用TRIzol法提取总RNA。使用PrimeScript RT试剂盒（TaKaRa）进行逆转录和TB Green Premix Ex Taq试剂盒（TaKaRa）进行qPCR。引物序列见表2。通过ABI Step One Plus序列检测和软件分析系统（Applied Biosystems）获知循环数（Ct），并采用2-△△CT的计算方法进行数据分析。细胞样本均以ACTB（actin beta）作为内参，至少重复3次实验。结果表示为倍变值（珚x±s），P<0.05表示差异有统计学意义。