《表2 RT-qPCR引物序列》

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《piRNA在小鼠非酒精性脂肪性肝病中的表达谱分析》


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由金开瑞生物工程有限公司(武汉)按照茎环法设计piRNA引物,引物序列见表2。按照EntiLinkTM1st Strand cDNA Synthesis Kit试剂盒(EQ003)的说明合成第一链cDNA。在StepOneTMReal-Time PCR仪(Life technologies公司)上完成RT-qPCR,以U6为内参基因,实验一式三份,使用EnTurboTMSYBR Green PCR SuperMix试剂盒进行(ELK Biotechnology,EQ001)。反应过程:95℃预变性3 min。95℃10 s,58℃30 s,72℃30 s,循环40次。数据分析采用2-ΔΔCT法。ΔΔCT法:A=CT(目的基因)-CT(内标基因),B=CT(目的基因)-CT(内标基因),K=A-B,表达倍数=2-K。