《表2 RT-qPCR引物序列》

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《乳酸菌对高糖高脂2型糖尿病小鼠血脂的影响》

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以冻存的附睾脂肪组织为材料，检测小鼠抗炎因子IL-10及脂联素基因Adipoq mRNA的表达。具体步骤如下[25]:采用Trizol提取组织总RNA（按Trizol说明书操作），获得的总RNA经过浓度测定和完整性验证，再根据PrimeScript?RT reagent试剂盒进行cDNA反转录，SYBR?Premix Ex Taq?试剂盒进行反转录实时荧光定量聚合酶链式反应（reverse transcription quantitative realtime polymerase chain reaction，RT-qPCR），以β-actin基因作内参。反应体系采用20μL体系:1μL cDNA模板，10μL SYBR?Premix，正、反引物各0.5μL，加灭菌双蒸水至20μL。反应程序为:95℃、30 s预变性；95℃、5 s变性，60℃、40 s退火延伸，循环40次。基因相对表达量采用2-△△Ct方法计算[26]。引物设计见表2。