《表1 引物信息:地熊蜂非视觉相关beta-arrestin基因的克隆与表达谱分析》

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《地熊蜂非视觉相关beta-arrestin基因的克隆与表达谱分析》


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根据熊蜂基因组数据库预测的beta-arrestin的ORF序列设计引物(表1),以反转录合成的熊蜂为模板扩增目的基因。PCR反应体系(25μL):Mix12.5μL;cDNA1μL;上下游引物(10μmol·L-1)各1μL;ddH2O9.5μL。PCR反应程序:94℃预变性2min,94℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸60s,共35个循环;最后72℃延伸2min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测后凝胶回收纯化并连接PMD-18T载体,转化涂板后筛选阳性克隆送测序。