《表1 miRNA特异性反转录引物》

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《miR-451a促进胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性》

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miRNA的反转录采用茎环法，通用茎环序列为GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCA CTGGATACGAC。取RNA 2μg、miRNA特异性反转录引物0.5μg，加水稀释至16μL，70℃结合5min后置于冰上，加入MMLV反转录酶和对应缓冲液、dNTP及RNase抑制剂，42℃反应1 h，95℃5 min灭活，得到cDNA第一链，稀释至100μL，用于下游qPCR反应。miRNA特异性反转录引物见表1。