《表1 CyHV-2扩增引物》
参照T.B.Waltzek等[12]设计引物对患病鱼组织进行CyHV-2 PCR检测(表1)。取患病鱼肝胰脏、脾脏、肾脏和鳃等组织,根据TRIzol试剂盒说明书快速提取DNA,接着进行PCR扩增。PCR扩增体系为:12.5μL Mix-reaction buffer,上、下游引物各1μL,加入cDNA模板2μL,8.5μL ddH2O。PCR扩增条件:95℃预变性5 min,95℃变性1 min,53℃复性30 s,72℃延伸1 min,30个循环,72℃延伸10 min。反应结束后取10μL扩增产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳,在凝胶成像系统下分析结果。PCR产物经DNA纯化试剂盒纯化后,送成都擎科生物技术有限公司进行序列测定。将测序结果在GenBank上进行BLAST比对。
图表编号 | XD0073482100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.28 |
作者 | 熊关庆、段靖、冯杨、倪萍、黄小丽、汪开毓、邓永强、耿毅、陈德芳、欧阳萍、杨世勇 |
绘制单位 | 四川农业大学动物科技学院、四川农业大学动物科技学院、四川农业大学动物科技学院、四川农业大学动物医学院、四川农业大学动物科技学院、四川农业大学动物医学院、四川省农业厅、四川农业大学动物医学院、四川农业大学动物科技学院、四川农业大学动物医学院、四川农业大学动物科技学院 |
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