《表1 用于递送CRISPR/Cas9系统的物理方法》

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《非病毒CRISPR/Cas9系统载体的研究进展》


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其他物理递送方法,包括细胞超声法[75]、激光照射法[76],也可用于CRISPR/Cas9系统的递送.它们的作用机制与上述三种物理方法相仿(表1),都是通过在细胞膜上产生瞬间穿孔从而实现对CRISPR体系的细胞内高效递送.所以都会造成潜在的细胞凋亡或细胞活性丧失等问题.此外,上述多种物理方法均无法直接对未经任何载体保护的裸露pDNA、mRNA或蛋白进行递送.故在将上述方法直接应用于组织或体内研究时,胰蛋白酶所带来的酶促降解和单核系统所引起的体内快速清除均会对CRISPR/Cas9系统的应用效率造成极大的影响.所以,采用安全性较高且毒副作用较小的非病毒载体进行递送可能在不久的将来会发挥主导作用(表2).